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比色法测酶活时,吸光度值过低应该怎么解决?
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【酪氨酸酶液的提取:称取去皮切碎马铃薯 2 g,按 1:5(m/V)的比例加入 10 mL 磷酸盐缓冲液(0.1 mol/L、pH 6.8),匀浆,低温离心 10 min (10000 r/min、 4 ℃ ), 上清溶液保存于冰浴或冰箱中,2 h 内用完。 酶活性的测定:测定管加入 1 mL 2 mmol/L 的L-多巴溶液、1.5 mL 磷酸盐缓冲液(0.1 mol/L、pH 6.8),充分混匀, 30 ℃ 水浴中温育 10 min 后,加入 0.5 mL酶提液,充分混匀,在 475 nm 波长下测定吸光度度值(OD)。开始前 6 min,每隔 30 s 测定记录一次,以后每隔 1 min 测定记录一次。依据直线斜率即可得到酶活力。】 框里的是实验方法,做到第6分钟吸光度才达到了0.1XX,这种情况下,想要增加吸光度,应该是在进行检测的时候把酶提液的体积增加,还是应该提取时把马铃薯与缓冲液的体积比降到1:4呀?提前感谢各位大佬! |
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