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ljf2608金虫 (正式写手)
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[交流]
【求助】双缩脲法测多肽的含量标曲的问题
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我想用双缩脲法测一下多肽的含量，做标曲的时候遇到了问题，想向大家请教一下： 文献中让用标准四肽做，但是由于标准四肽太贵，老师让用谷胱甘肽代替。但是谷胱甘肽的效果太差了，第一次做的时候，浓度太小，第二次的时候，浓度加为2，3，4，5，6，7，8，9mg/ml的时候，开始还有梯度，但是到了5就又开始变小，变得小于0.2了，到了9也就是0.17左右。第三次做的时候浓度为10，20，30，40，50，60，70，80，90mg/ml，结果加入双缩脲试剂后根本没有颜色变化，都是透明无色的，很郁闷。后来细细看了双缩脲的原理，在碱性条件下才能显示紫红色，而我是根据文献报道用三氯乙酸配制的，看来是很大的问题了，但是在测多肽时，也是要用三氯乙酸沉淀蛋白质的啊！希望虫虫们给我一些好的建议。谢谢！ [ Last edited by sugl on 2009-5-14 at 13:30 ] |
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