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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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yjc8183

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 请问:用什么方法测定蛋白含量?

RT,近来计划测定一下动物组织的蛋白含量,查了下资料,有用普通分光光度计的,有用酶标仪的。这两者到底有没有差别,区别在哪里,希望思考过此问题并用过的大侠解答一下,顺便说说注意点。
另外,测定所用试剂也有很多种:BCA、lowry 法(folin 酚试剂法)、Bradford 法(考马斯亮蓝染色法),尽管看了许多文献,还是拿不定注意,请用过的虫友叙说一二,再次小虫多谢了!
没有用过的或者搜索出来结果的,在此谢谢你,就不要回答了。
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liuke009

铁杆木虫 (著名写手)


yjc8183(金币+1,VIP+0):谢谢! 5-14 13:24
我一般都用Bradford 法,96孔板或者比色皿的都用过,当然多稀释几个梯度是必须的。
还有一种方法是酸水解成氨基酸,再测氨基酸的含量。
这些方法都很粗糙,不过楼主测测组织蛋白总含量,应该也不是要最精确的数据吧,应该够用了
8楼2009-05-14 13:06:41
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fxl530

木虫 (小有名气)


yjc8183(金币+1,VIP+0):非常感谢!请问酶标仪和分光光度计测定结果如何?如重复性、灵敏度等。 5-13 16:16
分光光度计和酶标仪没有区别的,酶标仪主要是一次可以测定多个样品,直接在酶标板中测定的。
lowry跟Brandford都可以,或者直接买试剂盒测定。Brandford法记得考马斯亮蓝一定是要过滤的否则根本不能用,切记。要注意的也就这个,其他的就直接照着方法做就行了。
2楼2009-05-13 16:07:41
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2die2005

金虫 (正式写手)


yjc8183(金币+1,VIP+0):谢谢,你们也是用分光光度计吗?我的量很少的,呵呵 5-13 16:18
我们实验室都是用的lowry法,貌似还不错的。PS:我们实验室都是做藻类的,所以基本上用的都是这个方法。
3楼2009-05-13 16:15:38
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guoxingjun2008

金虫 (正式写手)

Brandford法可以!
4楼2009-05-13 16:22:08
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