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yjc8183铁杆木虫 (著名写手)
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[交流]
请问：用什么方法测定蛋白含量？
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RT，近来计划测定一下动物组织的蛋白含量，查了下资料，有用普通分光光度计的，有用酶标仪的。这两者到底有没有差别，区别在哪里，希望思考过此问题并用过的大侠解答一下，顺便说说注意点。 另外，测定所用试剂也有很多种：BCA、lowry 法（folin 酚试剂法）、Bradford 法（考马斯亮蓝染色法），尽管看了许多文献，还是拿不定注意，请用过的虫友叙说一二，再次小虫多谢了！ 没有用过的或者搜索出来结果的，在此谢谢你，就不要回答了。 |
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yjc8183(金币+5,VIP+0):非常感谢！谢谢你的指教！ 5-14 12:48
yjc8183(金币+5,VIP+0):非常感谢！谢谢你的指教！ 5-14 12:48
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一般来说，分光光度计测出来的数据比酶标仪精确。但是，酶标仪多使用96孔酶标板，一次可以测96个数据，而分光光度计一般一次只能测一个读数，这样分次测其实更容易引入误差。有时候连标准曲线都做不出来。 我们实验室是用酶标仪的 ， 考马斯亮蓝法，但SDS等去垢剂对吸光值有影响。适宜波长应该是595，但是酶标仪没有这个波长的，这也是个问题。我们就用最接近的620代替了，也可以用。 其实这些蛋白测定方法都不太精确，只能大致确定。如果想更精确，可以把你的样品梯度稀释一下多测几个重复。 [ Last edited by baisuilan on 2009-5-14 at 11:39 ] |
6楼2009-05-14 11:36:47
2楼2009-05-13 16:07:41
3楼2009-05-13 16:15:38
guoxingjun2008
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4楼2009-05-13 16:22:08