应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 求助
101/1返回列表
查看: 988  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

18341841548

新虫 (小有名气)
已领完
求助
领取红包 (小木虫手机app专属红包)

扫一扫，下载小木虫客户端

我想问大家一下，我现在做蛋白纯化，细胞破壁液是有活性的，并且很大，现在纯化的蛋白没有活性，考虑是咪唑抑制酶活，但是我超滤除去咪唑，顺带浓缩，酶活有了一点点，但是很小，请问大家知道什么原因嘛？哪里除了问题？非常感谢

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2019-03-16 09:22:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

applesz

新虫 (小有名气)
纯化温度过高？

发自小木虫Android客户端
回复此楼
7楼2019-03-16 09:35:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18341841548

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by applesz at 2019-03-16 09:35:18
纯化温度过高？

首先SDS_PAGE检测纯化的蛋白浓度还是挺大的，我确实是在室温下纯化的，如果蛋白胶图纯化蛋白浓度挺大，这种情况也要考虑温度的原因导致失活嘛？我自己认为应该不会这么快

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2019-03-16 09:41:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

applesz

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 18341841548 at 2019-03-16 09:41:44
首先SDS_PAGE检测纯化的蛋白浓度还是挺大的，我确实是在室温下纯化的，如果蛋白胶图纯化蛋白浓度挺大，这种情况也要考虑温度的原因导致失活嘛？我自己认为应该不会这么快
...

酶失去活性与蛋白浓度没有太大的关联吧，酶活中心结构发生变化也有可能会导致酶失活吧。个人觉得温度是一个可能的因素，温度不同，可能酶所处的构象不一样，但不知道会不会适合你的体系，纯化的时候加点蛋白酶抑制剂。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2019-03-16 11:23:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18341841548

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by applesz at 2019-03-16 11:23:20
酶失去活性与蛋白浓度没有太大的关联吧，酶活中心结构发生变化也有可能会导致酶失活吧。个人觉得温度是一个可能的因素，温度不同，可能酶所处的构象不一样，但不知道会不会适合你的体系，纯化的时候加点蛋白酶抑制 ...

好的  非常感谢您的建议 第一次接触这方面实验  很多细节想不到  但是我的出发点 必须这个酶得有活性

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2019-03-16 13:46:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
hdchina20102楼
2019-03-16 09:23   回复  
18341841548(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
zfpd27663楼
2019-03-16 09:29   回复  
18341841548(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
8219524664楼
2019-03-16 09:30   回复  
18341841548(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
zxp3826332405楼
2019-03-16 09:31   回复  
18341841548(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
飞翔之翼986楼
2019-03-16 09:32   回复  
18341841548(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
相关版块跳转 我要订阅楼主 18341841548 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭