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时光fade

铜虫 (初入文坛)

[求助] 载体验证 已有2人参与

求助大神~
刚来实验室,导师说之前留了一个重组载体,已经很长时间了,让我验证下,想问下该怎么验证?
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lizimu566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
酶切验证或者测序验证
2楼2019-03-11 11:41:53
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时光fade

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lizimu566 at 2019-03-11 11:41:53
酶切验证或者测序验证

据之前留下的信息,这个载体内有两个目的基因,是不是酶切之后有这两个目的条带就验证了?
3楼2019-03-11 15:28:50
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macgray1

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
根据载体图谱,利用现有的内切酶,进行酶切验证,当然最好是把MCS区域测序验证一下,这样最保险了
4楼2019-03-12 09:43:07
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时光fade

铜虫 (初入文坛)

5楼2019-03-12 09:55:07
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好运连连OK

新虫 (小有名气)

最好测序验证一下,用载体上的通用引物测个序,和你导师构建的时候的结果比对一下,完全一致就没问题

发自小木虫Android客户端
6楼2019-03-12 09:55:37
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lizimu566

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 时光fade at 2019-03-11 15:28:50
据之前留下的信息,这个载体内有两个目的基因,是不是酶切之后有这两个目的条带就验证了?...

片段大小一致,一般就可以,最好是测序验证一下。
7楼2019-03-12 11:12:56
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时光fade

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 好运连连OK at 2019-03-12 09:55:37
最好测序验证一下,用载体上的通用引物测个序,和你导师构建的时候的结果比对一下,完全一致就没问题

谢谢答主,我在郑州这边
8楼2019-03-14 17:41:34
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时光fade

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by lizimu566 at 2019-03-12 11:12:56
片段大小一致,一般就可以,最好是测序验证一下。...

谢谢。
另外还想再问一个问题,之前留下的载体是已经转到农杆菌里面的,我怎样可以将它扩增一下?实验室只存了一管,想再扩增点,查了一下说做PCR,但是这种的PCR没有做过,能否指点一二,万分感谢
9楼2019-03-14 17:43:39
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Esther_Young

铜虫 (小有名气)

有质粒图谱的话 设计引物用农杆菌菌液PCR验证就行了,条带大小一致即可

发自小木虫IOS客户端
10楼2019-03-15 00:36:32
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