应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何检测蛋白在大肠杆菌中的不表达是因为mRNA的不稳定？
51/1返回列表
查看: 736  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

hongkaichen

金虫 (小有名气)

[交流] 如何检测蛋白在大肠杆菌中的不表达是因为mRNA的不稳定？

RT   如何检测蛋白在大肠杆菌中的不表达是因为mRNA的不稳定？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-05-09 19:57:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongkaichen

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lifefamily at 2009-5-13 15:38:
关键是，大肠杆菌是如此成熟的一个表达系统，为何就你这个蛋白的mRNA没有polyA修饰呢？

这个我不知道怎么回答你，在大肠杆菌里确实有一小段polyA，如果PolyA酶突变了，或其他与ployA形成有关的蛋白突变了导致PolyA不能形成，这样导致mRNA不稳定也可能。其实我想问的重点是假如是mRNA不稳定的话，有什么方法可以检测？如果你要说不可能是mRNA不稳定照成的，那么你就设计一个实验来排除这种可能，理论还是需要实验来验证的。
赞一下 回复此楼
7楼2009-05-13 16:10:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

lifefamily

★
hongkaichen(金币+1,VIP+0):谢谢回答，这是老师的一个作业，跟实验无关. 5-13 12:55
有怎么一说？
不表达的因素多了：
细胞毒性，N端信号肽，稀有密码子，等等。
你换GST或者Trx融合试过了么？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-05-13 10:23:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongkaichen

金虫 (小有名气)
这是老师的一个作业，思考题，跟实验无关，因为mRNA不稳定也可能造成蛋白不表达，所以如果是这种原因，就是让我们用什么方法验证是不是这种原因。开始我觉得可以用观察多聚核糖体现象来验证，但这种方法不能排除菌自身的蛋白表达也能产生这种现象。如果用RT-PCR  P出来了不知道能不能说有mRNA存在，然后排除掉这种原因？
赞一下 回复此楼
3楼2009-05-13 13:01:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifefamily

真的，我还第一次听说跟mRNA不稳定有关，孤陋寡闻了……
三、mRNA稳定性与翻译控制
mRNA稳定性主要取决于3’—UTR结构
1．poly(A)尾增加mRNA稳定性，
2．3’-UTR中UA序列导致mRNA不稳定．


高手帮我扫盲一下！？

[ Last edited by lifefamily on 2009-5-13 at 15:09 ]
赞一下 回复此楼
4楼2009-05-13 15:06:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +3 芦lty 2026-03-25 4/200 2026-03-25 23:25 by 芦lty
[考研] 316求调剂 +9 梁茜雯 2026-03-19 9/450 2026-03-25 23:01 by peike
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +7 niko- 2026-03-22 7/350 2026-03-25 20:14 by qingfeng258
[考研] 机械学硕总分317求调剂！！！！ +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 生物技术与工程 +3 1294608413 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:02 by 1294608413
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 281求调剂 +4 Koxui 2026-03-24 5/250 2026-03-25 11:38 by userper
[考研] 318求调剂 +5 plum李子 2026-03-21 8/400 2026-03-25 09:26 by aa331100
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +10 纸鱼ly 2026-03-21 11/550 2026-03-24 17:22 by qingfeng258
[考研] 070300化学求调剂 +9 苑豆豆 2026-03-20 9/450 2026-03-24 17:15 by licg0208
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工 264分各科过A区国家线 +3 哈哈157349 2026-03-21 3/150 2026-03-24 14:11 by zhyzzh
[考研] 一志愿国科过程所081700，274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
[考研] 生物学一志愿985，分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭