应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何检测蛋白在大肠杆菌中的不表达是因为mRNA的不稳定？
52/1返回列表
查看: 701  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

hongkaichen

金虫 (小有名气)

[交流] 如何检测蛋白在大肠杆菌中的不表达是因为mRNA的不稳定？

RT   如何检测蛋白在大肠杆菌中的不表达是因为mRNA的不稳定？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-05-09 19:57:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongkaichen

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by rourou6199 at 2009-5-14 17:18:
好像可以加ActD或者Dox抑制转录后，分几个时间段提RNA做Northern看RNA降解没有

ActD或者Dox抑制转录的机制是什么？如果抑制转录后就转录了一部分，mRNA只有一段，用Northern检测不能说明有全长吧？
赞一下 回复此楼
11楼2009-05-14 20:47:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

lifefamily

★
hongkaichen(金币+1,VIP+0):谢谢回答，这是老师的一个作业，跟实验无关. 5-13 12:55
有怎么一说？
不表达的因素多了：
细胞毒性，N端信号肽，稀有密码子，等等。
你换GST或者Trx融合试过了么？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-05-13 10:23:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongkaichen

金虫 (小有名气)
这是老师的一个作业，思考题，跟实验无关，因为mRNA不稳定也可能造成蛋白不表达，所以如果是这种原因，就是让我们用什么方法验证是不是这种原因。开始我觉得可以用观察多聚核糖体现象来验证，但这种方法不能排除菌自身的蛋白表达也能产生这种现象。如果用RT-PCR  P出来了不知道能不能说有mRNA存在，然后排除掉这种原因？
赞一下 回复此楼
3楼2009-05-13 13:01:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifefamily

真的，我还第一次听说跟mRNA不稳定有关，孤陋寡闻了……
三、mRNA稳定性与翻译控制
mRNA稳定性主要取决于3’—UTR结构
1．poly(A)尾增加mRNA稳定性，
2．3’-UTR中UA序列导致mRNA不稳定．


高手帮我扫盲一下！？

[ Last edited by lifefamily on 2009-5-13 at 15:09 ]
赞一下 回复此楼
4楼2009-05-13 15:06:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭