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WuYing59捐助贵宾 (初入文坛)
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仅用BSA封闭的荧光微球(未加抗体)与二抗的非特异性吸附问题
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在利用仅用BSA封闭的荧光微球(未加抗体)进行试验时,发生了非特异性吸附问题。 即在标记过程中,本来应该加入抗体,这里用BSA代替了抗体。 类似于免疫荧光试纸条,在NC膜上C线包被了混合二抗(羊抗鼠/羊抗兔),T线包被了相应抗原。为证明仅用BSA封闭的荧光微球与混合二抗或抗原不发生非特异性吸附,使用仅用BSA封闭的荧光微球进行试验,结果在紫外灯照射下,C线产生荧光,T线不产生荧光。正常情况下不是应该两条线都不显荧光么?出现这种情况可能的原因是什么? 自己猜测:可能是没封闭好,荧光微球与二抗发生了结合?那与T线抗原为何不产生结合呢? 麻烦各位大神指教是哪里出了问题! |
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