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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫实验 » 仅用BSA封闭的荧光微球（未加抗体）与二抗的非特异性吸附问题
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WuYing59

捐助贵宾 (初入文坛)

[交流] 仅用BSA封闭的荧光微球（未加抗体）与二抗的非特异性吸附问题

在利用仅用BSA封闭的荧光微球（未加抗体）进行试验时，发生了非特异性吸附问题。
即在标记过程中，本来应该加入抗体，这里用BSA代替了抗体。

类似于免疫荧光试纸条，在NC膜上C线包被了混合二抗（羊抗鼠/羊抗兔），T线包被了相应抗原。为证明仅用BSA封闭的荧光微球与混合二抗或抗原不发生非特异性吸附，使用仅用BSA封闭的荧光微球进行试验，结果在紫外灯照射下,C线产生荧光，T线不产生荧光。正常情况下不是应该两条线都不显荧光么？出现这种情况可能的原因是什么？

自己猜测：可能是没封闭好，荧光微球与二抗发生了结合？那与T线抗原为何不产生结合呢？

麻烦各位大神指教是哪里出了问题！
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1楼 2019-02-21 21:32:30
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)
★
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可能是BSA封闭剂没起到封闭的作用，二抗非特异吸附到微球上了，如果二抗的成分复杂为多抗，这个现象是很可能存在的。建议你换个单克隆的抗体，或者更换分子量更小的封闭剂如酪蛋白再试试
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2楼2019-02-22 16:35:57
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落雨sjh

铁杆木虫 (职业作家)

沈益锋
★
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非特异性吸附 肯定会有的，蛋白与蛋白之间也会的
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细水长流
3楼2019-03-01 17:51:28
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金芭比bo

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
荧光微球是掺杂Eu嘛？

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4楼2021-04-11 18:10:27
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