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怎样确认EDC反应合成抗原成功
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| 我现在用EDC方法合成N-乙酸西地那非-BSA抗原，扫了BSA和产物的紫外全波长和红外，看不出有什么区别，应该是没有合成成功。但是这个方法很经典，怎样都应该是有一点产物的。如果反应不成功，请求各位给点建议和方法。 |
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6楼2009-05-08 22:30:45
2楼2009-05-07 10:24:36
yu5445233
木虫 (正式写手)
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3楼2009-05-07 10:25:20
leonumn
铁杆木虫 (著名写手)
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N-乙酸西地那非是小分子酸 BSA是大分子蛋白, 在碱性条件或等电点PH以上才能游离出氨基 EDC是水溶性缩合剂, 因此, 只要反应PH值合适, 时间较长, 形成N-乙酸西地那非-BSA抗原是合理可行的(经典方法嘛), 用物理或化学方法直接检测N-乙酸西地那非是否连到BSA上很难, 除非小分子有特殊集团,特征吸收或特殊标记. 如果有N-乙酸西地那非抗体, 用ELISA简单测定复合物能否结合抗体就可以了 如果没有抗体, 就只能做免疫实验, 看看能否产生抗体了(听天由命, 但希望还是大大的,确只要每步操作都规范化了) 祝好运气!!! |
4楼2009-05-07 10:36:22