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木虫 (正式写手)

小虫

恩,你这是没有表达,测序只是基因层面的验证,代表你的基因构建正确,是否有表达是蛋白层面的结果,基因经历转录翻译这个过程变成蛋白。蛋白大小是根据基因bp计算的,通过软件就能计算出来。怎么判断有表达,比如你的蛋白30kd,在sdspage胶上,marker对应的30kd处左右,是否有明显的条带,有就是有表达,另外你可以最WB验证灵敏度更高
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
11楼2019-02-14 11:46:41
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a13515517892

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by pc1453 at 2019-01-21 13:19:33
测序也正确,确定带有目的基因的质粒也转化进去了,怎么会没有表达呢...

有时间你的基因和选的载体以及菌株不合适也是不表达的,所以你要多次少选方案
12楼2019-02-15 14:31:46
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wdc123

新虫 (小有名气)

13楼2019-03-21 11:11:50
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二久

新虫 (初入文坛)

我们实验室也有同样的问题。目前估计诱导条件需要探索

发自小木虫Android客户端
14楼2019-04-21 14:25:18
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GGGTF

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

15楼2019-07-28 11:04:32
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陈磊fight

银虫 (小有名气)

建议带一个westernblot,如果确定质粒转化进去了,有标签WB检测能看出信号就一定表达了,否则不然只能说明该蛋白确实表达不了。其次可以优化培养基,诱导条件等参数来提高表达量,希望对你有帮助

发自小木虫Android客户端
16楼2019-09-21 10:20:23
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