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做western出现了一个问题，想请各位老师们帮忙分析一下，期待回复，感谢！ 已有1人参与
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本人刚开始做western，想请教一下大家，我曝的 actin，转膜的时候电流400ma，转了70min，然后发现marker不只转到膜上了，也转到滤纸上了，而且三层滤纸都转上了，然后我去曝光的时候发现膜上什么也没有，我就怀疑是不是我转膜的时候过转了，蛋白都转滤纸上了，所以才没曝出来。 可是别的实验室也有400ma转70min的，也能做出来，也没出现过marker转到滤纸上的情况，所以想请教楼主这是什么原因，有的老师说转膜的时候就算时间长了也不会过转的，蛋白质会和膜结合在一起，所以还想问一下转膜时到底会不会出现过转的情况。感谢！ @gyesang 发自小木虫Android客户端 |
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4楼2019-01-20 11:08:25
药大C斌
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
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- 散金: 1000
- 红花: 4
- 帖子: 675
- 在线: 65.7小时
- 虫号: 1883968
- 注册: 2012-07-08
- 专业: 主动脉疾病
2楼2019-01-19 10:25:48
chaosyw
铁杆木虫 (正式写手)
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- 注册: 2014-01-28
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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楼上正解，应该是转过了，推荐一篇wb操作方面的综述供参考吧： https://www.labome.com/method/We ... s-and-Reagents.html |
3楼2019-01-20 10:12:20
5楼2019-01-20 11:08:52
