应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 做western出现了一个问题，想请各位老师们帮忙分析一下，期待回复，感谢！
51/1返回列表
查看: 1226  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

鲲407

新虫 (初入文坛)

[求助] 做western出现了一个问题，想请各位老师们帮忙分析一下，期待回复，感谢！ 已有1人参与

本人刚开始做western，想请教一下大家，我曝的 actin，转膜的时候电流400ma，转了70min，然后发现marker不只转到膜上了，也转到滤纸上了，而且三层滤纸都转上了，然后我去曝光的时候发现膜上什么也没有，我就怀疑是不是我转膜的时候过转了，蛋白都转滤纸上了，所以才没曝出来。

可是别的实验室也有400ma转70min的，也能做出来，也没出现过marker转到滤纸上的情况，所以想请教楼主这是什么原因，有的老师说转膜的时候就算时间长了也不会过转的，蛋白质会和膜结合在一起，所以还想问一下转膜时到底会不会出现过转的情况。感谢！

@gyesang 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2019-01-19 09:36:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

药大C斌

新虫 (正式写手)
不同的转膜液配方，转膜时间不一样，最好自己摸索一下条件。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2019-01-19 10:25:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chaosyw

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼上正解，应该是转过了，推荐一篇wb操作方面的综述供参考吧：
https://www.labome.com/method/We ... s-and-Reagents.html
赞一下 回复此楼
3楼2019-01-20 10:12:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鲲407

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 药大C斌 at 2019-01-19 10:25:48
不同的转膜液配方，转膜时间不一样，最好自己摸索一下条件。

好的，谢谢！

发自小木虫Android客户端
回复此楼
4楼2019-01-20 11:08:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鲲407

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by chaosyw at 2019-01-20 10:12:20
楼上正解，应该是转过了，推荐一篇wb操作方面的综述供参考吧：
https://www.labome.com/method/Western-Blot-Protocol-Troubleshootings-and-Survey-Results-on-Instruments-and-Reagents.html

感谢！

发自小木虫Android客户端
回复此楼
5楼2019-01-20 11:08:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 鲲407 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭