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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 金葡菌生物被膜结晶紫染色
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卷耳顿

新虫 (初入文坛)

[求助] 金葡菌生物被膜结晶紫染色 已有1人参与

结晶紫染色空白孔OD过高是怎么回事有人知道吗？
步骤:1.pbs洗三遍  2.200ul的甲醇37℃固定10min 3.150ul的1%结晶紫37℃染色5min  4.400ul的pbs洗 5.等待干燥 6.加33%冰醋酸150ul震荡20min 7.移入u底96孔板125ul测od
我的od空白孔有2.0这么高，是怎么回事啊？
有尝试过 1.降低结晶紫浓度 2.用乙醇脱色

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1楼 2019-01-08 09:49:42
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axxxx

铁虫 (初入文坛)
请问您洗染色液的时候怎么保证不把膜洗起来呢，我也是OD值过大，我觉得是因为我没洗干净孔壁，但是又怕太大力洗会把膜洗走

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9楼2019-10-26 22:56:55
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CRUSH123

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

您好，请问您的问题解决了么？
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2楼2019-03-06 10:33:18
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卷耳顿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by CRUSH123 at 2019-03-06 10:33:18
您好，请问您的问题解决了么？

你好，之前解决了，现在又结果不行了

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3楼2019-03-15 13:20:33
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卷耳顿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by CRUSH123 at 2019-03-06 10:33:18
您好，请问您的问题解决了么？

算是解决了，结晶紫配制: 0.05g溶至95%乙醇，再加入4ml，得到0.1%的溶液，现用现配。
然后，不要倒在平皿，从试管里面用200ul的枪一个个孔加，在温箱孵育5min

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4楼2019-03-20 20:06:35
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