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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物效应评价 » 【请教】固定细胞扫SEM的操作细节，有金币，呵呵
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milk5852

禁虫 (著名写手)
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1楼 2009-05-02 23:09:02
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xhyu2936

金虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★
milk5852(金币+3,VIP+0):谢谢，很详细啦，呵呵 5-3 12:44
zhangwj(金币+3,VIP+0):版内出一样的金币奖励！谢谢应助！ 5-4 14:19
1、PBS冲洗是指把PBS轻轻滴加在有细胞的材料表面？还是真的用吸管去冲洗？
如果要防止细胞被冲走，可以沿培养板壁慢慢加入PBS; 当然你这里说取样点为4， 7天，应该没有这个问题。只是这个时间说短， 看不到细胞粘附；说长，还不到细胞分化；当然这和你使用什么细胞有关。

2、戊二醛也是滴在上面还是把材料浸泡在戊二醛溶液里面？
一般采用把样品浸泡在戊二醛里面；时间上一般细胞的话，1h足够了，时间紧半个小时亦可
3、乙醇也是轻轻滴加在上面？是一次脱水共计15min，还是每个浓度15min？
乙醇也是采用浸泡，脱水每个浓度10-20min,根据样品细胞来。
4、啥样的玻璃瓶比较好，玻璃培养皿行不？乙酸乙酯怎么替换啊？滴加还是浸泡？浓度多少呢？
一般的培养板或者培养皿都可；乙酸乙酯并不是每个人都用，大部分只要乙醇置换，CO2临界点干燥就是了。如果一定要用，应该还是浸泡；注意的地方是动作要快，100%乙醇挥发极快。
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2楼2009-05-03 04:44:57
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milk5852

禁虫 (著名写手)
wgcui(金币+0,VIP+0):欢迎参与，支持新虫！ 5-5 08:41
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3楼2009-05-04 10:59:09
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xyz401

铁杆木虫 (小有名气)
不懂，帮顶了
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有机合成，新药研发
4楼2009-05-04 14:17:03
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zhaoting2007

金虫 (小有名气)
CO2临界点干燥需要什么仪器？没有这一步行吗，也就是说乙醇脱水后直接自然条件下干燥？
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5楼2009-05-06 17:46:18
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milk5852

禁虫 (著名写手)
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6楼2009-05-06 23:19:38
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xhyu2936

金虫 (初入文坛)
Google is gonna answer all your questions!

[ Last edited by xhyu2936 on 2009-5-7 at 01:50 ]
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7楼2009-05-07 01:48:04
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chl3398

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎讨论 5-7 22:46
milk5852(金币+2,VIP+0):给了我一点启发，谢谢！ 5-9 00:13
引用回帖:
Originally posted by milk5852 at 2009-5-6 23:19:
我用酒精脱水后放冰箱，过一会就自己风干了，看文献上说风干是绝对不行的，那酒精和乙酸乙酯挥发的那么快，一下就干了，怎么去CO2干燥啊

先准备好一个带盖子玻璃容器（如用过的青霉素瓶），加入一定量乙酸异戊酯（要能泡住材料），从无水乙醇中取出你的材料后就放进去，盖好盖子，替换30min后就可以去临界点干燥了
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8楼2009-05-07 09:02:47
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stent

金虫 (著名写手)
如果没有二氧化碳临界点干燥器，还有别的什么干燥办法吗？冷冻干燥可以吗？
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9楼2009-05-07 09:09:34
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chl3398

银虫 (小有名气)
冷冻干燥没试过，不知会不会影响细胞形貌
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10楼2009-05-07 09:11:44
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