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Cherishqj专家顾问
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紫外吸收法测酶活
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| 本人纯化了一个重组酶，想测试是否有活性，按文献中的方法测定235nm处的紫外吸收，但是我在用对照组标零的时候吸光值一直在变，范围还挺大的，之前用这台分光光度计做蛋白浓度的标曲是没有问题的（当时用的595nm波长），我的对照组是将酶煮沸5min灭活，再加底物，师姐说可能蛋白变性了导致溶液不稳定，我又把对照改成了只有底物，吸光度仍然无法标零，但是当我把波长改为400nm，600nm的时候，标零是没有问题的，这到底是为什么啊？？？为什么在可见光范围内就是稳定的呢？实验室两台分光光度计我都试了，分光光度计是新世纪T9紫外可见分光光度计，希望能给点建议，谢谢大家 |
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Cherishqj
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