24小时热门版块排行榜    

查看: 836  |  回复: 15
当前主题已经存档。

x8q4h11

木虫 (小有名气)

[交流] 有关菌液PCR

各位虫友,大家好,做过菌液PCR的分享一下经验吧。我开始的时候能够P出来,可是最近就是P不出来了……
我的方法:
取摇菌过夜菌液1mL,离心,去上清,用1mL双蒸水重悬菌体,沸水浴5-10分钟,取2微升菌液做PCR。

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-19 at 13:13 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xia710516

金虫 (正式写手)

这个没有什么经验可谈吧,很容易的
2楼2009-04-29 18:36:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

miniPCR没什么要注意的,一般只要你的引物没错,菌液含有连有目的片段的载体,都可以出结果的
会当凌绝顶,一览众山小
3楼2009-04-29 18:44:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anik

银虫 (正式写手)

要好菌后直接取菌液进行PCR,不需要的其他的处理。
4楼2009-04-29 18:44:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)

换酶。。
5楼2009-04-29 20:55:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuer413023

至尊木虫 (文坛精英)

没事领金币

我师兄一般都是加好dntp,buffer,ddh2o,引物,酶,然后用牙签蘸少许菌落到pcr管中进行pcr
上邪!我欲与君相知,长命无绝衰。山无陵,江水为竭,冬雷震震,夏雨雪,天地合,乃敢与君绝!
6楼2009-04-29 22:15:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aga0110125

银虫 (小有名气)

菌液不要加太多,沾一下即可,模板过多不利扩增,另外,第一步热变性时间稍长一点就可以了
7楼2009-04-30 11:15:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peizhilee

金虫 (小有名气)

1ul模板就可以了吧,一般就能做出来了。菌液太多有可能扩增出非特异条带。
一念成魔,一念成佛
8楼2009-04-30 11:38:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

x8q4h11

木虫 (小有名气)

谢谢大家!
9楼2009-04-30 13:32:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thaw

铜虫 (小有名气)

按正常PCR配好体系后吸1微升菌液做模版
程序96℃5分钟——[95℃30秒-xx30 秒-72℃XX】——72℃10分钟-16℃
30个循环
10楼2009-04-30 16:00:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 x8q4h11 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +4 RichLi_ 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:33 by 18337163304
[考研] 求调剂323材料与化工 +4 1124361 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:19 by shulmg
[考研] 085600材料与化工调剂 +9 A-哆啦Z梦 2026-03-23 15/750 2026-03-25 11:18 by Ainin_
[考研] 299求调剂 +7 shxchem 2026-03-20 9/450 2026-03-25 10:41 by lbsjt
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +10 纸鱼ly 2026-03-21 11/550 2026-03-24 17:22 by qingfeng258
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 361求调剂 +3 Glack 2026-03-22 3/150 2026-03-23 22:03 by fuyu_
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 材料与化工085600,总分304,本科有两篇sci参与,求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 一志愿深大,0703化学,总分302,求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
信息提示
请填处理意见