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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 分类/鉴定 » 测序双峰
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BaoTin

新虫 (初入文坛)

[求助] 测序双峰 已有2人参与

在菌株测序时，一个方向双峰，另一个方向不双峰，也更换引物过，结果还是一样，也稀释涂布平板过，最后结果还是一样，不知道哪方面出现了问题，有人知道吗？

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1楼 2018-12-11 14:07:29
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
snoopytbw: 金币+3, 有帮助 2018-12-14 11:17:10
如果是质粒的话，一般是因为质粒不纯造成的，可以划线去选单菌落试试
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···
2楼2018-12-11 21:23:47
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BaoTin

新虫 (初入文坛)
我用的是单菌落也是这样的结果，提DNA也是这样结果

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3楼2018-12-13 21:19:22
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BaoTin

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小冀- at 2018-12-11 21:23:47
如果是质粒的话，一般是因为质粒不纯造成的，可以划线去选单菌落试试

我用的是单菌落也是这样的结果，提DNA也是这样结果

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4楼2018-12-13 21:19:45
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GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
snoopytbw: 金币+3, 略有帮助 2018-12-14 11:17:02
排除测序引物不纯和产物不纯的情况下，polyA/T结构之后经常会出现移码、双峰、套峰现象，而在polyG/C之后经常出现测序信号的衰减或者直接中断。用反向引物测即可。

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2019更好更棒!
5楼2018-12-13 22:08:12
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
引用回帖:
4楼: Originally posted by BaoTin at 2018-12-13 21:19:45
我用的是单菌落也是这样的结果，提DNA也是这样结果
...

额，好吧，你考虑一下楼上的建议
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···
6楼2018-12-14 10:43:48
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