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求助：测氧位甲基转移酶酶活 已有1人参与
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求助：测氧位甲基转移酶酶活 在pet28a载体上连接了我的目的片段，测序正确，但是在载体连接时没有加上终止子。iptg18度诱导18h，上清液中有目的蛋白被检测出，将收集的大肠杆菌用溶菌酶4度30min，破碎离心后得到上清液，对底物进行测试发现没有酶活，酶活反应加药在冰上进行，35度水浴一小时，hplc检测不到生成物，判断没有酶活产生。跪求大神知道，不知道问题出现在哪里。p.s.查阅相关文献，有人用过该载体进行实验并且成功了。急急急，金币不够了  还望各路大神支招！！！ |
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