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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » 求助：测氧位甲基转移酶酶活
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1005lys

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助：测氧位甲基转移酶酶活 已有1人参与

求助：测氧位甲基转移酶酶活
  在pet28a载体上连接了我的目的片段，测序正确，但是在载体连接时没有加上终止子。iptg18度诱导18h，上清液中有目的蛋白被检测出，将收集的大肠杆菌用溶菌酶4度30min，破碎离心后得到上清液，对底物进行测试发现没有酶活，酶活反应加药在冰上进行，35度水浴一小时，hplc检测不到生成物，判断没有酶活产生。跪求大神知道，不知道问题出现在哪里。p.s.查阅相关文献，有人用过该载体进行实验并且成功了。急急急，金币不够了还望各路大神支招！！！
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1楼 2018-12-09 18:04:12
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1005lys

新虫 (初入文坛)
有人么有人么 求大神帮助
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2楼2018-12-13 08:21:38
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峰子大牛

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是不是溶菌酶没有裂解呢  你最后是怎么解决的呢

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3楼2019-06-03 23:11:58
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