应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 有关提取水和土壤中总DNA
61/1返回列表
查看: 540  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

jhcln

金虫 (小有名气)

[交流] 有关提取水和土壤中总DNA

提取水和土壤中总DNA，异丙醇沉淀24h，离心，得到好多白色沉淀，请问这是析出的SDS还是别的什么东西？急切盼望各位指教！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-04-29 00:15:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
什么方法提取的?CTAB? 4度离心的?异丙醇沉淀的时候是在冰箱里面沉淀的么?说清楚点.如果白色沉淀很多的话就是SDS了.否则生物量不可能那么多的
赞一下 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2009-04-29 01:21:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jhcln

金虫 (小有名气)

求助

引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2009-4-29 01:21:
什么方法提取的?CTAB? 4度离心的?异丙醇沉淀的时候是在冰箱里面沉淀的么?说清楚点.如果白色沉淀很多的话就是SDS了.否则生物量不可能那么多的

多谢楼上大哥指教，用得周集中的SDS高盐法！
这样的话，该怎样去除SDS呢？得到的粗DNA怎样纯化？具体纯化步骤能说得详细点吗？不要试剂盒的呵呵。另外这粗DNA还有色素，该如何除去？望各位大哥不吝赐教！！
赞一下 回复此楼
3楼2009-04-29 09:59:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haoran930

银虫 (小有名气)
现在试剂盒纯化很方便，也不是很贵，效果很好，可以试一下。我们做土壤微生物DNA也试过自己纯化，效果不好。如果后续做PCR可以稀释大倍数试一下
赞一下 回复此楼
4楼2009-04-29 22:00:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
引用回帖:
Originally posted by jhcln at 2009-4-29 09:59:


多谢楼上大哥指教，用得周集中的SDS高盐法！
这样的话，该怎样去除SDS呢？得到的粗DNA怎样纯化？具体纯化步骤能说得详细点吗？不要试剂盒的呵呵。另外这粗DNA还有色素，该如何除去？望各位大哥不吝赐教！！

指教称不上,呵呵,不要沉淀那么长时间,按照原文来,室温沉淀1h,然后离心收集DNA,土壤的生物量不是很多,所以最后贴在离心管壁上的带有黄褐色的那点东西就是DNA,然后可以加适量TE在4度让它溶解,不要急着用移液枪抽吸,很容易打断DNA.纯化方法取决于你最后的目的,入楼上所言,要是你PCR的话,选择一个比较简单的纯化方法,纯化到看不到黄褐色,然后稀释倍数PCR,肯定能出来.要是你的DNA要求量多纯度高的话就得选择一个好的纯化方法了,可以试试QIAGEN的胶回收试剂盒,40KB的那个,货号忘记了,你自己有目录的话翻翻看吧.
晕,不好意思,没有看见你 不要试剂盒 那句 ,那你就不要嫌麻烦,用透析袋方法来做吧,不过纯化效果不敢说很好,方法在  分子克隆手册上面有,你自己看看.透析袋的话上海生工的就可以了.
赞一下 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
5楼2009-04-30 01:09:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jhcln

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2009-4-30 01:09:



指教称不上,呵呵,不要沉淀那么长时间,按照原文来,室温沉淀1h,然后离心收集DNA,土壤的生物量不是很多,所以最后贴在离心管壁上的带有黄褐色的那点东西就是DNA,然后可以加适量TE在4度让它溶解,不要急着用移液枪 ...

非常感谢！
回复此楼
6楼2009-05-06 17:33:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jhcln 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求b区院校调剂 +3 周56 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:17 by 周56
[考研] 总分293求调剂 +4 加一一九 2026-03-25 4/200 2026-03-25 12:56 by Dyhoer
[考研] 281求调剂 +4 Koxui 2026-03-24 5/250 2026-03-25 11:38 by userper
[考研] 材料调剂 +3 iwinso 2026-03-23 3/150 2026-03-25 11:29 by greychen00
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 求调剂，一志愿:南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕，总分289分 +6 @taotao 2026-03-19 6/300 2026-03-25 08:37 by 木托莫露露
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 277分求调剂，跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 一志愿国科过程所081700，274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂 +5 jiajunX 2026-03-22 5/250 2026-03-23 18:07 by YMU施老师
[考研] 298求调剂 +8 上岸6666@ 2026-03-20 8/400 2026-03-23 11:02 by laoshidan
[考研] 323求调剂 +6 洼小桶 2026-03-18 6/300 2026-03-23 00:29 by king123！
[考研] 352求调剂 +3 大米饭！ 2026-03-22 3/150 2026-03-22 23:28 by king123！
[考研] 考研调剂 +4 来好运来来来 2026-03-21 4/200 2026-03-22 12:15 by 星空星月
[考研] 一志愿华中科技大学071000，求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭