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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 全血样品加酸之后怎么完全沉淀
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a皑雪c

银虫 (正式写手)

[交流] 全血样品加酸之后怎么完全沉淀

做的是生物分析，测定全血中某一个药物的含量，但是用甲醇沉淀提取回收率几乎为零，现在试出来是沉淀剂加酸，回收率达到100，但是酸化后全血并不能完全沉淀掉，取出来的上清是糊状的，放置十几分钟就不会流动了。有没有什么办法可以将全血完全沉淀掉呢，多谢了！

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1楼2018-12-02 19:14:48
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a皑雪c

银虫 (正式写手)
没有大神回复啊

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2楼2018-12-03 12:21:23
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a皑雪c

银虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 不才ulin at 2018-12-03 21:41:07
用乙腈加酸沉淀试过么

没有，因为是个多肽，刚开始沉淀血浆，直接用甲醇，怕乙腈直接把多肽沉掉  后来发现血浆特别不稳定，想着直接采完全血沉淀掉     我觉得用乙腈应该也一样，因为全血被酸化了，成团了  
现在有一个想法是加盐有可能将胶状物破坏，沉淀可能好一些，还没有试  
谢谢你的解答，我有时间试一试

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4楼2018-12-03 22:42:54
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a皑雪c

银虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by liuzhaomin at 2018-12-05 01:44:15
多肽药物我之前做过，由于多肽结构亲水性强，采用液液萃取回收率极低，最好的方法是用固相萃取柱纯化，样品上柱后先采用低浓度甲醇（60-80%）清洗蛋白，然后采用加甲酸（0.05-0.1%左右）的纯甲醇洗脱药物，回收率可 ...

你用的是HLB的还是离子交换柱的一种  全血可以SPE吗

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6楼2018-12-05 13:35:16
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a皑雪c

银虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by liuzhaomin at 2018-12-05 13:50:41
用的是waters的Oasis HLB柱。我当时用的血浆，全血应该也可以，你可以试试。其实分离血浆也不难，只需要采血时候往血里加抗凝剂，再离心就行。...

你好，我现在在做另一个多肽，分子量2900多，含有26个氨基酸，其中六个赖氨酸，一个组氨酸，它是强碱性的还是弱碱性的呢   用固相萃取的话是WCX还是MCX呢，我试了HLB MCX WCX都不行    你当时做的多肽酸碱性了解吗，HLB第一部你加酸或者碱稀释再上样还是直接上样

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8楼2019-11-24 21:25:25
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