24小时热门版块排行榜    

查看: 2053  |  回复: 8

a皑雪c

银虫 (正式写手)

[交流] 全血样品加酸之后怎么完全沉淀

做的是生物分析,测定全血中某一个药物的含量,但是用甲醇沉淀提取回收率几乎为零,现在试出来是沉淀剂加酸,回收率达到100,但是酸化后全血并不能完全沉淀掉,取出来的上清是糊状的,放置十几分钟就不会流动了。有没有什么办法可以将全血完全沉淀掉呢,多谢了!

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a皑雪c

银虫 (正式写手)

2楼2018-12-03 12:21:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不才ulin

新虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用乙腈加酸沉淀试过么

发自小木虫IOS客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

额。。。。
3楼2018-12-03 21:41:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a皑雪c

银虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 不才ulin at 2018-12-03 21:41:07
用乙腈加酸沉淀试过么

没有,因为是个多肽,刚开始沉淀血浆,直接用甲醇,怕乙腈直接把多肽沉掉  后来发现血浆特别不稳定,想着直接采完全血沉淀掉     我觉得用乙腈应该也一样,因为全血被酸化了,成团了  
现在有一个想法是加盐有可能将胶状物破坏,沉淀可能好一些,还没有试  
谢谢你的解答,我有时间试一试

发自小木虫Android客户端
4楼2018-12-03 22:42:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuzhaomin

金虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
多肽药物我之前做过,由于多肽结构亲水性强,采用液液萃取回收率极低,最好的方法是用固相萃取柱纯化,样品上柱后先采用低浓度甲醇(60-80%)清洗蛋白,然后采用加甲酸(0.05-0.1%左右)的纯甲醇洗脱药物,回收率可达95%以上。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

5楼2018-12-05 01:44:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a皑雪c

银虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by liuzhaomin at 2018-12-05 01:44:15
多肽药物我之前做过,由于多肽结构亲水性强,采用液液萃取回收率极低,最好的方法是用固相萃取柱纯化,样品上柱后先采用低浓度甲醇(60-80%)清洗蛋白,然后采用加甲酸(0.05-0.1%左右)的纯甲醇洗脱药物,回收率可 ...

你用的是HLB的还是离子交换柱的一种  全血可以SPE吗

发自小木虫Android客户端
6楼2018-12-05 13:35:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuzhaomin

金虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by a皑雪c at 2018-12-05 13:35:16
你用的是HLB的还是离子交换柱的一种  全血可以SPE吗
...

用的是waters的Oasis HLB柱。我当时用的血浆,全血应该也可以,你可以试试。其实分离血浆也不难,只需要采血时候往血里加抗凝剂,再离心就行。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

7楼2018-12-05 13:50:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a皑雪c

银虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by liuzhaomin at 2018-12-05 13:50:41
用的是waters的Oasis HLB柱。我当时用的血浆,全血应该也可以,你可以试试。其实分离血浆也不难,只需要采血时候往血里加抗凝剂,再离心就行。...

你好,我现在在做另一个多肽,分子量2900多,含有26个氨基酸,其中六个赖氨酸,一个组氨酸,它是强碱性的还是弱碱性的呢   用固相萃取的话是WCX还是MCX呢,我试了HLB MCX WCX都不行    你当时做的多肽酸碱性了解吗,HLB第一部你加酸或者碱稀释再上样还是直接上样

发自小木虫Android客户端
8楼2019-11-24 21:25:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuzhaomin

金虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by a皑雪c at 2019-11-24 21:25:25
你好,我现在在做另一个多肽,分子量2900多,含有26个氨基酸,其中六个赖氨酸,一个组氨酸,它是强碱性的还是弱碱性的呢   用固相萃取的话是WCX还是MCX呢,我试了HLB MCX WCX都不行    你当时做的多肽酸碱性了解吗 ...

我当时采用的是HLB柱,测的是10肽,第一步活化柱子用的是甲醇,然后上样,低浓度甲醇水淋洗,最后洗脱用的是含甲酸的纯甲醇。你说试了HLB MCX WCX都不行,具体是什么操作步骤,能说一下么?
9楼2019-12-09 13:32:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 a皑雪c 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 8/400 2026-08-25 05:12 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 人气不行了 +10 fansofjerry 2026-08-21 10/500 2026-08-24 21:03 by zhanghaozhu
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤?
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 19/950 2026-08-24 16:52 by iaeyuan
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +6 炎黄贵胄 2026-08-22 7/350 2026-08-24 11:58 by 6543yes
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见