| 查看: 1458 | 回复: 2 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
FITC标记蛋白方法 已有1人参与
|
||
|
本人最近在做FITC标记溶菌酶的一个实验，文献写的是混合低温搅拌2小时，之后离心除去不溶物取上清液透析 过柱就可得到标记的蛋白。投了几次反应之后取上清液测紫外，发现蛋白含量很少。进行透析之后溶液没有颜色了。后来我反应了7小时，离心有好多沉淀，测紫外发现蛋白质都沉底了。我在网上和论坛也搜了一些文献，说的不是特别详细，不知道怎么算标记上了。有没有师兄师姐做过FITC标记蛋白的实验，本人是研1新生，求大神们帮忙解释一下。谢谢了。 @hc-material @gyesang 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
科研人应该花精力去思考如何解决问题，而不是去凝练问题
已经有11人回复
-
要骂人了，新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西，结果有个评委还在说凝练得不够
已经有17人回复
-
基金系统什么内容也没有
已经有10人回复
-
学科评审组评审是指会评吗？
已经有5人回复
-
梦想
已经有8人回复
-
面上合作单位盖章
已经有9人回复
-
面上函评意见出来了，像什么等级？
已经有17人回复
-
为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难
已经有14人回复
-
小白求助 投论文要求的highlights应该如何写
已经有4人回复
-
麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上）
已经有12人回复
3楼2021-10-20 20:09:51
www.hyl.com
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 560.6
- 帖子: 25
- 在线: 55.1小时
- 虫号: 3941309
- 注册: 2015-06-26
- 性别: MM
- 专业: 蛋白质组学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
Procedure 1. Dissolve protein and FITC in carbonate-bicarbonate buffer. 2. Slowly add FITC to protein with stirring. Cover with foil and stir 2 hours at room temperature. 3. Separate conjugate from free FITC on G-25 column. Collect fractions. 4. Pool fractions containing conjugate. 5. Determine F/P ratio of conjugate spectrophotometrically. 6. Stabilize with 1% bovine serum albumin and 0.1% sodium azide and store at 0-5 °C. 可试试室温搅拌 |
2楼2018-12-03 11:13:17
20