| 查看: 1322 | 回复: 2 | |||
[求助]
FITC标记蛋白方法 已有1人参与
|
|
本人最近在做FITC标记溶菌酶的一个实验，文献写的是混合低温搅拌2小时，之后离心除去不溶物取上清液透析 过柱就可得到标记的蛋白。投了几次反应之后取上清液测紫外，发现蛋白含量很少。进行透析之后溶液没有颜色了。后来我反应了7小时，离心有好多沉淀，测紫外发现蛋白质都沉底了。我在网上和论坛也搜了一些文献，说的不是特别详细，不知道怎么算标记上了。有没有师兄师姐做过FITC标记蛋白的实验，本人是研1新生，求大神们帮忙解释一下。谢谢了。 @hc-material @gyesang 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。
已经有5人回复
-
0856求调剂
已经有9人回复
-
一志愿 南京邮电大学 288分 材料考研 求调剂
已经有3人回复
-
材料与化工304求B区调剂
已经有5人回复
-
一志愿北京化工大学材料与化工（085600）296求调剂
已经有5人回复
-
275求调剂
已经有7人回复
-
274求调剂
已经有19人回复
-
总分293求调剂
已经有8人回复
-
北科281学硕材料求调剂
已经有17人回复
-
寻找调剂
已经有8人回复
www.hyl.com
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 560.6
- 帖子: 25
- 在线: 55.1小时
- 虫号: 3941309
- 注册: 2015-06-26
- 性别: MM
- 专业: 蛋白质组学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
Procedure 1. Dissolve protein and FITC in carbonate-bicarbonate buffer. 2. Slowly add FITC to protein with stirring. Cover with foil and stir 2 hours at room temperature. 3. Separate conjugate from free FITC on G-25 column. Collect fractions. 4. Pool fractions containing conjugate. 5. Determine F/P ratio of conjugate spectrophotometrically. 6. Stabilize with 1% bovine serum albumin and 0.1% sodium azide and store at 0-5 °C. 可试试室温搅拌 |
2楼2018-12-03 11:13:17
3楼2021-10-20 20:09:51
6