| 查看: 2807 | 回复: 21 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
求助各位做过质粒接合实验的师兄师姐 已有4人参与
|
|||
|
我做的是肺炎克雷伯菌转移到ec600我的肺克都带有kpc耐药基因，质粒的话最少都有两个质粒并且大小都在90kb，都是低拷贝质粒，已经做了几个月也没有筛到结合子，我用的是利福平300和亚胺2的量，单菌落增菌4h，然后调0.5麦氏，取供受1比2比例混合静止结合4h，取100ul涂板，对照板没有菌，双抗平板长出来的菌落再一次画到双抗平板上就没有了，这是什么原因呢，是我没结合成功，还是质粒结合不稳定，不能继续传代呢？请做过的师兄师姐帮忙看看，之前也做过一次电转，用的是dh5a制备感受态，质粒是用天跟试剂盒提取的，质粒电泳条带非常多，可能是本来细菌就有几个质粒然后质粒电泳又跑出了三种形态的原因，但是电转没有一株成功的，现在很迷茫，卡在这里好久了，后面实验也做不下去真的很无奈。 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？
已经有3人回复
-
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有18人回复
-
国自然评审意见
已经有15人回复
-
为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难
已经有13人回复
-
国自然面上复盘~欢迎讨论
已经有14人回复
-
系统查不到
已经有11人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
|
大神，我问了一个做过这个的师兄，他说我可以试试用肺克做感受态电转，然后我刚才搜索好像看到大神你之前回复别人，做肺克的感受态可行吗对于我这种天然质粒来说，还有做肺克的感受态一般用什么菌呢，ATCC吗？谢谢大神 发自小木虫IOS客户端 |
17楼2018-12-06 16:42:45
2楼2018-11-27 07:44:51
snoopytbw
荣誉版主 (著名写手)
- MicEPI: 6
- 应助: 261 (大学生)
- 贵宾: 0.014
- 金币: 5985.4
- 散金: 3
- 红花: 71
- 帖子: 1633
- 在线: 265小时
- 虫号: 3361216
- 注册: 2014-08-11
- 性别: MM
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
3楼2018-11-27 08:54:09
snoopytbw
荣誉版主 (著名写手)
- MicEPI: 6
- 应助: 261 (大学生)
- 贵宾: 0.014
- 金币: 5985.4
- 散金: 3
- 红花: 71
- 帖子: 1633
- 在线: 265小时
- 虫号: 3361216
- 注册: 2014-08-11
- 性别: MM
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
5楼2018-11-27 09:00:02
30