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花梨酱

新虫 (小有名气)

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[求助] 求助小木虫的各位大神前辈们已有1人参与

要做抗菌实验，复苏了保存在-20°冰箱里的菌种（金黄色葡萄球菌ATCC25923）。取了200微升加入到3毫升LB液体培养基中，培养了大概两个小时，管壁有明显气泡产生。我振摇之后，继续培养了四个小时。但菌液没有变浑浊，画板子接种到平板上也没有长出菌落。到底是哪里出了点问题啊，之前复活的菌也是液体培养基培养有气泡产生，但是培养了一天也不浑浊，接到固体培养基上也长不出来菌落。
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1楼 2018-11-21 00:26:10

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1034714749

铜虫 (小有名气)

应助: 23 (小学生)
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专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
snoopytbw: 金币+3, 鼓励 2018-11-21 17:04:55

看完了楼上的评论，大体总结一下：
-20℃在甘油1：1的情况下不适合保存1年半那么久的，短期内保存个1月2个月还好，里面的菌可能所剩无几，或者活性非常低了。
解决：
1.多培养几天，看菌体是否还能长起来，如果长起来，多转接几次还是能恢复的
2.还有多少冻存的菌，留下一管，其他都培养了吧，挽救菌株是比较重要的
3.-20℃只能短期内存放，我们实验室短期存放也是要冻存在-40℃的，很少-20℃冻存菌株，而且会在-80℃冰箱里冻存一管备用，一旦有其他发现用途，或者为了建库，还要冻干后-80℃保存菌粉。