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要做抗菌实验，复苏了保存在-20°冰箱里的菌种（金黄色葡萄球菌ATCC25923）。取了200微升加入到3毫升LB液体培养基中，培养了大概两个小时，管壁有明显气泡产生。我振摇之后，继续培养了四个小时。但菌液没有变浑浊，画板子接种到平板上也没有长出菌落。到底是哪里出了点问题啊，之前复活的菌也是液体培养基培养有气泡产生，但是培养了一天也不浑浊，接到固体培养基上也长不出来菌落。 跪求解答~跪求解答呀 @天使托 发自小木虫Android客户端 |
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2楼2018-11-21 08:48:09
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xiecj
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楼主是将冻存于-20的菌株复苏，不是复苏后又保存在-20！不过，楼上有句话说得对，你这原先的菌株有没有加甘油什么的！以及，你这细菌保存多久了？-20度不适合长期保存，我觉得可能是菌株活力不够了，你先试着接着多摇一段时间，比如8小时以上，看看是否浑浊 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2018-11-21 09:08:52
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xiecj
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7楼2018-11-21 12:15:26
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
snoopytbw: 金币+3, 鼓励 2018-11-21 17:04:55
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看完了楼上的评论，大体总结一下： -20℃在甘油1：1的情况下不适合保存1年半那么久的，短期内保存个1月2个月还好，里面的菌可能所剩无几，或者活性非常低了。 解决： 1.多培养几天，看菌体是否还能长起来，如果长起来，多转接几次还是能恢复的 2.还有多少冻存的菌，留下一管，其他都培养了吧，挽救菌株是比较重要的 3.-20℃只能短期内存放，我们实验室短期存放也是要冻存在-40℃的，很少-20℃冻存菌株，而且会在-80℃冰箱里冻存一管备用，一旦有其他发现用途，或者为了建库，还要冻干后-80℃保存菌粉。 |
8楼2018-11-21 14:49:51
9楼2018-11-21 15:04:17
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