24小时热门版块排行榜    

查看: 822  |  回复: 9
当前主题已经存档。

wzh0209

木虫 (正式写手)

[交流] 真菌DNA扩增后跑胶出现问题

真菌提取DNA后的进行了相关基因的PCR之后,进行琼脂糖凝胶的检测,之前做的都可以跑出目的条带,但是现在的却得不到目的条带,结果如下图,我的DNA 放置了将近4个月了,请各位高手帮忙分析原因,谢谢.

[ Last edited by wzh0209 on 2009-4-24 at 18:06 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Sarah_Shy

木虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极分享奖 4-25 00:56
4个月?差不多都降解了吧。即使没降解,放那么久做PCR影响也很大了。建议楼主重提DNA吧~
2楼2009-04-24 23:40:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lcx_2008

木虫 (小有名气)

我做反转录时,最后的PCR产物跑胶时也出现过这种现象。我的RNA CDNA都是当天提取并合成的(RNA的提取和CDNA的合成都是用的试剂盒),也是当天进行的PCR,结果跑胶时就出现这种情况,我也不知道是什么原因呢,请高手指点,谢谢!!!
3楼2009-04-28 09:21:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wzh0209

木虫 (正式写手)

谢谢交流,现在我进行了DNA重新提取,但是PCR之后的结果还是这样的?请帮忙分析原因!谢谢了!
4楼2009-04-29 15:38:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

spiderboy

金虫 (正式写手)

楼主,再检查一下你PCR设计的引物,出现不了目的条带,一般是引物出了问题。。。当然,首先要保证你的操作没有问题。。。

如果不麻烦的话,能不能把你的实验具体情况发在贴里,这样大家方便交流。。比如P什么片段,P的条件之类的。。。
5楼2009-04-29 16:56:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

spiderboy

金虫 (正式写手)

二楼的虫虫,我觉得你出现这样的情况很有可能是在实验操作过程中受RNA酶的污染了,,建议你再重新检查下实验过程,翻下笔记,所用的所有东西都要严格按照做RNA的相关要求。。。
6楼2009-04-29 16:58:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smallcat227

木虫 (著名写手)

出现这样的条带似乎多半是模板问题,不过既然你已经直接提了,可以试试降下模板浓度,适当提高退火温度和减少循环次数
7楼2009-04-29 21:28:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lcx_2008

木虫 (小有名气)

谢谢指点!!
8楼2009-05-03 13:52:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

紫天图

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫特级潜水员

造成这种现象的原因很多,你最好把详细的操作过程贴上来,不然很难回答你的提问。
9楼2009-05-03 16:44:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

紫天图

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫特级潜水员

我也做过真菌,曾遇到过类似问题。
10楼2009-05-03 16:45:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wzh0209 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 275求调剂 +3 明远求学 2026-03-01 3/150 2026-03-01 22:29 by 刘兵
[考研] 0856材料与化工,270求调剂 +5 YXCT 2026-03-01 5/250 2026-03-01 21:54 by 公瑾逍遥
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 292求调剂 +5 yhk_819 2026-02-28 5/250 2026-03-01 21:38 by 公瑾逍遥
[考研] 0856求调剂285 +10 吕仔龙 2026-02-28 10/500 2026-03-01 21:37 by 公瑾逍遥
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 6/300 2026-03-01 21:24 by cgyzqwn
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 272求调剂 +6 材紫有化 2026-02-28 6/300 2026-03-01 18:58 by 18137688336
[考研] 0856材料求调剂 +11 hyf hyf hyf 2026-02-28 12/600 2026-03-01 18:57 by 18137688336
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博!
[考研] 化工专硕348,一志愿985求调剂 +5 弗格个 2026-02-28 8/400 2026-03-01 17:25 by sunny81
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂; 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 284求调剂 +6 天下熯 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:19 by Ducount.Y
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见