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147258sci

新虫 (初入文坛)

[求助] 丝状真菌原生质体释放后很容易破碎吗? 已有2人参与

请教各位大神,在制备原生质体的过程中,酶解后镜检是看到数量不小的原生质体细胞的,但是离心重悬之后再镜检就发现原生质体消失了~!!
箱请教一下可能是出现问题的地方是在哪里呢?
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rabbit12510

铁虫 (小有名气)

我想问一下你做什么真菌啊,能分享一下方法吗

发自小木虫IOS客户端
2楼2018-11-16 06:50:59
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rabbit12510

铁虫 (小有名气)

我遇到和你同样的问题了,不知道你解决了没有

发自小木虫IOS客户端
3楼2018-11-17 15:44:33
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屎胖纸

铁虫 (小有名气)


drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-11-30 00:40:54
引用回帖:
2楼: Originally posted by rabbit12510 at 2018-11-16 06:50:59
我想问一下你做什么真菌啊,能分享一下方法吗

先液体摇培,然后进行酶解,就可以得到原生质体
4楼2018-11-20 19:51:12
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147258sci

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by rabbit12510 at 2018-11-17 15:44:33
我遇到和你同样的问题了,不知道你解决了没有

摇培菌丝,酶液裂解,最后涂板再生就好了

发自小木虫Android客户端
5楼2018-11-28 14:17:58
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rabbit12510

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 147258sci at 2018-11-28 14:17:58
摇培菌丝,酶液裂解,最后涂板再生就好了
...

我还要转化,原生质体浓度不够,没法转化啊

发自小木虫IOS客户端
6楼2018-11-29 07:15:43
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yxx20060429

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不要用太高转速离心,亲
7楼2018-12-05 08:51:32
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小殿下

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我做过稻瘟,核盘菌和灰霉的原生质体,都是在冰上操作,四度离心5000rpm,如果原生质体本身不多,收集不要用大管的,用2.0或者1.5EP管,洗的时候,离心2分钟。要看看你的步骤是什么?酶解时间不要太长了
天道酬勤
8楼2019-01-14 20:49:12
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