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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 丝状真菌原生质体释放后很容易破碎吗？
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147258sci

新虫 (初入文坛)

[求助] 丝状真菌原生质体释放后很容易破碎吗？ 已有2人参与

请教各位大神，在制备原生质体的过程中，酶解后镜检是看到数量不小的原生质体细胞的，但是离心重悬之后再镜检就发现原生质体消失了~！！
箱请教一下可能是出现问题的地方是在哪里呢？
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1楼 2018-11-15 20:16:21
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rabbit12510

铁虫 (小有名气)
我想问一下你做什么真菌啊，能分享一下方法吗

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2楼2018-11-16 06:50:59
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rabbit12510

铁虫 (小有名气)
我遇到和你同样的问题了，不知道你解决了没有

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3楼2018-11-17 15:44:33
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屎胖纸

铁虫 (小有名气)
★
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-11-30 00:40:54
引用回帖:
2楼: Originally posted by rabbit12510 at 2018-11-16 06:50:59
我想问一下你做什么真菌啊，能分享一下方法吗

先液体摇培，然后进行酶解，就可以得到原生质体
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4楼2018-11-20 19:51:12
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147258sci

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by rabbit12510 at 2018-11-17 15:44:33
我遇到和你同样的问题了，不知道你解决了没有

摇培菌丝，酶液裂解，最后涂板再生就好了

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5楼2018-11-28 14:17:58
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rabbit12510

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 147258sci at 2018-11-28 14:17:58
摇培菌丝，酶液裂解，最后涂板再生就好了
...

我还要转化，原生质体浓度不够，没法转化啊

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6楼2018-11-29 07:15:43
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yxx20060429

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不要用太高转速离心，亲
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7楼2018-12-05 08:51:32
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小殿下

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我做过稻瘟，核盘菌和灰霉的原生质体，都是在冰上操作，四度离心5000rpm，如果原生质体本身不多，收集不要用大管的，用2.0或者1.5EP管，洗的时候，离心2分钟。要看看你的步骤是什么？酶解时间不要太长了
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天道酬勤
8楼2019-01-14 20:49:12
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