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kkmonkey

荣誉版主 (著名写手)

小木虫食品研究中心前主任

[交流] 培养大肠杆菌过程中的困惑求助

现在做大肠杆菌的扩培,用的是LB培养基。别人论文中提到:接种菌液后,需要加入一定量的葡萄糖和乳糖,到一定浓度。
      请问:1,加葡萄糖和乳糖什么作用呢?
               2,加到的浓度是多少呢?葡萄糖和乳糖本身的浓度是多少?
     由于本人没有做过微生物相关的试验,现在硕士课题不得不做,很茫然,请高手指导,不甚感激!
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shenqicc

金虫 (小有名气)

加入葡萄糖是为了作为外加C源促进大肠杆菌的生长,因为大肠杆菌最易利用葡萄糖,但要控制好量,浓度高了产乙酸过多,反而抑制菌的生长,而加乳糖是对于Lac等启动子介导下的重组表达,跟加入IPTG一样的效果,这点很多写工程菌发酵的文章中都有涉及,因为IPTG就是乳糖类似物,同样乳糖的浓度也不能高。要看你最终要表达的目的产物的量再进行优化了。至于发酵时候的培养基可以尝试用TB不用LB,那里面用的甘油!~~
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13楼2009-05-07 20:57:17
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anik

银虫 (正式写手)

1%(W/V)        Tryptone
                                                     0.5%(W/V)     Yeast Extract
                                                     1%(W/V)        NaCl
培养大肠杆菌不需要葡糖糖吧?
LB培养基就是用来培养大肠杆菌的。
2楼2009-04-21 11:55:07
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

10g/L Tryptone
                                                     
5g/L   Yeast Extract
                                                     
10g/L      NaCl  

pH7.2灭菌即可。

加葡萄糖也可,要是你用pET质粒表达重组蛋白的话。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
3楼2009-04-21 12:23:44
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kkmonkey

荣誉版主 (著名写手)

小木虫食品研究中心前主任

谢谢啊

谢谢两位大侠的指点。那说明我参照的论文有问题。哈。不过问过一个老师,他说可以加乳糖,是什么促进剂?有这一说法吗?具体为什么加呢?
喜欢飞和跑的懒猪
4楼2009-04-21 13:05:49
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