24小时热门版块排行榜    

查看: 1436  |  回复: 12
当前主题已经存档。

kkmonkey

荣誉版主 (著名写手)

小木虫食品研究中心前主任

[交流] 培养大肠杆菌过程中的困惑求助

现在做大肠杆菌的扩培,用的是LB培养基。别人论文中提到:接种菌液后,需要加入一定量的葡萄糖和乳糖,到一定浓度。
      请问:1,加葡萄糖和乳糖什么作用呢?
               2,加到的浓度是多少呢?葡萄糖和乳糖本身的浓度是多少?
     由于本人没有做过微生物相关的试验,现在硕士课题不得不做,很茫然,请高手指导,不甚感激!
回复此楼
喜欢飞和跑的懒猪
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anik

银虫 (正式写手)

1%(W/V)        Tryptone
                                                     0.5%(W/V)     Yeast Extract
                                                     1%(W/V)        NaCl
培养大肠杆菌不需要葡糖糖吧?
LB培养基就是用来培养大肠杆菌的。
2楼2009-04-21 11:55:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

10g/L Tryptone
                                                     
5g/L   Yeast Extract
                                                     
10g/L      NaCl  

pH7.2灭菌即可。

加葡萄糖也可,要是你用pET质粒表达重组蛋白的话。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
3楼2009-04-21 12:23:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kkmonkey

荣誉版主 (著名写手)

小木虫食品研究中心前主任

谢谢啊

谢谢两位大侠的指点。那说明我参照的论文有问题。哈。不过问过一个老师,他说可以加乳糖,是什么促进剂?有这一说法吗?具体为什么加呢?
喜欢飞和跑的懒猪
4楼2009-04-21 13:05:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elvias

铁杆木虫 (正式写手)

单纯培养不用加葡萄糖和乳糖,配LB我都是用自来水,效果一样好,如果表达的话,建议还使用TM培养基,表达效果要好有一些,但也不是绝对的。
5楼2009-04-21 13:54:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gastrodia

金虫 (正式写手)

通常在培养基中添加乳糖和葡萄糖是作为诱导表达的诱导子,你要看一下文章中所用的质粒上面有什么样的启动子
6楼2009-04-21 14:22:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kkmonkey

荣誉版主 (著名写手)

小木虫食品研究中心前主任

太感谢了!

改天忙完了赠金币哦,嘿嘿
喜欢飞和跑的懒猪
7楼2009-04-21 15:45:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifefamily

加IPTG是诱导表达用的啊!
培养归培养,37°C摇上3、4个小时以后再加IPTG表达外源蛋白。
8楼2009-04-21 16:56:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuhan86

木虫 (小有名气)


sutao1979(金币+1,VIP+0):thanks 5-7 15:16
葡萄糖是用作培养基碳源和能源的,如果你希望获得较多菌体的话,可以适当加点碳源,但是葡萄糖的量太多,产生乙酸会抑制大肠杆菌的生长,因此也可以用甘油作碳源。葡萄糖是大肠杆菌最先利用的糖类,当培养基中没有其它糖类时,乳糖也可以作为碳源被大肠利用,如果你的大肠是工程菌,T7启动子的话,乳糖同时还可以作为诱导剂,诱导你的目的蛋白的表达。
9楼2009-04-25 14:26:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuhan86

木虫 (小有名气)

如果是LB培养基,不做Fedbatch培养,可以加0.25%葡萄糖
10楼2009-04-25 14:31:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kkmonkey 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见