应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 培养大肠杆菌过程中的困惑求助
131/2返回列表12下一页
查看: 1266  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

kkmonkey

荣誉版主 (著名写手)

小木虫食品研究中心前主任

[交流] 培养大肠杆菌过程中的困惑求助

现在做大肠杆菌的扩培，用的是LB培养基。别人论文中提到：接种菌液后，需要加入一定量的葡萄糖和乳糖，到一定浓度。
      请问：1，加葡萄糖和乳糖什么作用呢？
               2，加到的浓度是多少呢？葡萄糖和乳糖本身的浓度是多少？
     由于本人没有做过微生物相关的试验，现在硕士课题不得不做，很茫然，请高手指导，不甚感激！
回复此楼

» 猜你喜欢
喜欢飞和跑的懒猪
1楼 2009-04-21 10:58:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anik

银虫 (正式写手)
1％（W/V）        Tryptone
                                                     0.5％（W/V）     Yeast Extract
                                                     1％（W/V）        NaCl
培养大肠杆菌不需要葡糖糖吧？
LB培养基就是用来培养大肠杆菌的。
赞一下 回复此楼
2楼2009-04-21 11:55:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
10g/L Tryptone
                                                     
5g/L   Yeast Extract
                                                     
10g/L      NaCl  

pH7.2灭菌即可。

加葡萄糖也可，要是你用pET质粒表达重组蛋白的话。
赞一下 回复此楼
【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
3楼2009-04-21 12:23:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kkmonkey

荣誉版主 (著名写手)

小木虫食品研究中心前主任

谢谢啊

谢谢两位大侠的指点。那说明我参照的论文有问题。哈。不过问过一个老师，他说可以加乳糖，是什么促进剂？有这一说法吗？具体为什么加呢？
赞一下 回复此楼
喜欢飞和跑的懒猪
4楼2009-04-21 13:05:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elvias

铁杆木虫 (正式写手)
单纯培养不用加葡萄糖和乳糖，配LB我都是用自来水，效果一样好，如果表达的话，建议还使用TM培养基，表达效果要好有一些，但也不是绝对的。
赞一下 回复此楼
5楼2009-04-21 13:54:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gastrodia

金虫 (正式写手)
通常在培养基中添加乳糖和葡萄糖是作为诱导表达的诱导子，你要看一下文章中所用的质粒上面有什么样的启动子
赞一下 回复此楼
6楼2009-04-21 14:22:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kkmonkey

荣誉版主 (著名写手)

小木虫食品研究中心前主任

太感谢了！

改天忙完了赠金币哦，嘿嘿
赞一下 回复此楼
喜欢飞和跑的懒猪
7楼2009-04-21 15:45:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifefamily

加IPTG是诱导表达用的啊！
培养归培养，37°C摇上3、4个小时以后再加IPTG表达外源蛋白。
赞一下 回复此楼
8楼2009-04-21 16:56:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuhan86

木虫 (小有名气)
★
sutao1979(金币+1,VIP+0):thanks 5-7 15:16
葡萄糖是用作培养基碳源和能源的，如果你希望获得较多菌体的话，可以适当加点碳源，但是葡萄糖的量太多，产生乙酸会抑制大肠杆菌的生长，因此也可以用甘油作碳源。葡萄糖是大肠杆菌最先利用的糖类，当培养基中没有其它糖类时，乳糖也可以作为碳源被大肠利用，如果你的大肠是工程菌，T7启动子的话，乳糖同时还可以作为诱导剂，诱导你的目的蛋白的表达。
赞一下(6人) 回复此楼
9楼2009-04-25 14:26:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuhan86

木虫 (小有名气)
如果是LB培养基，不做Fedbatch培养，可以加0.25%葡萄糖
赞一下 回复此楼
10楼2009-04-25 14:31:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kkmonkey 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 网络空间安全0839招调剂 +3 w320357296 2026-03-25 5/250 2026-03-25 15:31 by w320357296
[考研] 329求调剂 +3 钮恩雪 2026-03-25 3/150 2026-03-25 14:43 by 糖加冰
[考研] 286求调剂 +11 Faune 2026-03-21 11/550 2026-03-25 10:11 by 雾散后相遇lc
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +7 holy J 2026-03-21 7/350 2026-03-24 17:24 by xiaohai104
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +10 纸鱼ly 2026-03-21 11/550 2026-03-24 17:22 by qingfeng258
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 291求调剂 +8 hhhhxn.. 2026-03-23 8/400 2026-03-23 23:15 by peike
[考研] 一志愿陕师大生物学071000，298分，求调剂 +3 SYA！ 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:09 by macy2011
[考研] 323求调剂 +6 洼小桶 2026-03-18 6/300 2026-03-23 00:29 by king123！
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 考研调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 22 350 本科985求调剂，求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭