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Alex_lv

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】关于苯酚硫酸法

本人用苯酚硫酸法测定多糖含量,做了很多重复试验,但是重现性总是不好,这是为什么呢?该如何改进呢?请高手指点一下!

[ Last edited by sugl on 2009-4-20 at 16:54 ]
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jxjgz

木虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
Alex_lv(金币+3,VIP+0):谢谢高手指点啊,会按您的建议改进! 4-20 18:37
Alex_lv(金币+2,VIP+0):阁下,金币都给你吧,肥水不流外人田 4-30 20:44
可能有以下问题需要注意:
1。苯酚是否重蒸、其溶液浓度、是否现配现用
2。加入硫酸后是否加热、显色时间的确定
3。阁下所选波长:这个最为重要,因为已糖及其甲基化衍生物在490nm下有最大吸收峰,而戊糖、糠醛酸及其甲基化衍生物在480nm下有最大吸收峰。如果阁下的多糖样品不是单一品而是数种混合(纯化也难一达到100%纯),则波长一定要扫描过再做
4。各个操作环节上的细心与细致,这个提不上桌面来说,但却是细微决定成败

希望对阁下有帮助,祝成功!
知识改变命运, 奋斗成就人生!
5楼2009-04-20 09:00:40
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missyouwq

木虫 (正式写手)


Alex_lv(金币+1,VIP+0):谢谢帮忙! 4-20 18:34
首先要从苯酚入手啊,苯酚一定要重蒸,这个过程比较艰苦,注意防护,然后再做,效果就好多了
锲而不舍,天道酬勤
2楼2009-04-19 10:04:31
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Alex_lv

金虫 (小有名气)

苯酚是重蒸过的,现配的,同一个样品做两次结果就不一样,郁闷啊!
3楼2009-04-19 10:23:19
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drongcheo

木虫 (小有名气)

★ ★
Alex_lv(金币+2,VIP+0):谢谢热心帮助,有时间多交流! 4-20 18:35
我也是做多糖提取的,楼主要注意两件事——第一,你的苯酚可能被氧化了,最好去蒸馏一下;第二,葡萄糖标品的物质可能不纯,要么没有在105摄氏度下烘干。
4楼2009-04-19 17:49:15
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