24小时热门版块排行榜    

查看: 330  |  回复: 4
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xialinfzdx

金虫 (初入文坛)

[交流] 求助:关于蛋白提取的问题

我想找一个能与promotor相结合的转录因子,用什么样的方法提取核内的蛋白质而不会影响蛋白质在体外与DNA的结合能力?
    我之前用裂解液提取,但是总没有蛋白能够binding上去,我导师说是因为裂解液里的TritonX-100影响了蛋白质与DNA的结合。
我的lysis buffer: 20mmol/L   Tris-HCl
                        150mmol/L  NaCl
                        5mmol/L      EDTA
                        10%           glycerol
                         0.1%         triton X-100

那位高手有好的提取方案,请不吝指教!!!谢谢!!!




很晕,今天查了一天的核蛋白提取方案,但是都需要高速离心,俺们实验室的离心机就到17000,达不到~还好刚才导师说有实验室可以做离心的~

[ Last edited by xialinfzdx on 2009-4-19 at 16:20 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张力民1598

铜虫 (小有名气)

你买试剂盒吧,就是比较贵。
5楼2009-04-20 09:30:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

张力民1598

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
xialinfzdx(金币+1,VIP+0): 4-19 08:53
xialinfzdx(金币+2,VIP+0): 4-21 15:49
我觉得你应该用提取核蛋白的方法,因为转录因子发挥基因调控的功能应该在核内,提总蛋白的话会有胞浆蛋白的干扰。
2楼2009-04-18 19:05:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xialinfzdx

金虫 (初入文坛)

我想知道哪种核蛋白提取方法不影响蛋白质后续与DNA的结合~
3楼2009-04-19 08:57:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 6/300 2026-03-01 21:24 by cgyzqwn
[考研] 299求调剂 +3 Y墨明棋妙Y 2026-02-28 5/250 2026-03-01 21:01 by tangxiaotian
[考研] 材料化工调剂 +10 今夏不夏 2026-03-01 11/550 2026-03-01 19:49 by 无懈可击111
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考研] 295求调剂 +7 19171856320 2026-02-28 7/350 2026-03-01 18:54 by 18137688336
[考研] 化工专硕348,一志愿985求调剂 +5 弗格个 2026-02-28 8/400 2026-03-01 17:25 by sunny81
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 303求调剂 +4 今夏不夏 2026-03-01 4/200 2026-03-01 14:46 by 嘟嘟小浣熊
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 284求调剂 +6 天下熯 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:19 by Ducount.Y
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业,申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 272求调剂 +4 田智友 2026-02-28 4/200 2026-03-01 06:43 by 刘兵
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧? +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
信息提示
请填处理意见