24小时热门版块排行榜    

查看: 334  |  回复: 4
当前主题已经存档。

xialinfzdx

金虫 (初入文坛)

[交流] 求助:关于蛋白提取的问题

我想找一个能与promotor相结合的转录因子,用什么样的方法提取核内的蛋白质而不会影响蛋白质在体外与DNA的结合能力?
    我之前用裂解液提取,但是总没有蛋白能够binding上去,我导师说是因为裂解液里的TritonX-100影响了蛋白质与DNA的结合。
我的lysis buffer: 20mmol/L   Tris-HCl
                        150mmol/L  NaCl
                        5mmol/L      EDTA
                        10%           glycerol
                         0.1%         triton X-100

那位高手有好的提取方案,请不吝指教!!!谢谢!!!




很晕,今天查了一天的核蛋白提取方案,但是都需要高速离心,俺们实验室的离心机就到17000,达不到~还好刚才导师说有实验室可以做离心的~

[ Last edited by xialinfzdx on 2009-4-19 at 16:20 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张力民1598

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
xialinfzdx(金币+1,VIP+0): 4-19 08:53
xialinfzdx(金币+2,VIP+0): 4-21 15:49
我觉得你应该用提取核蛋白的方法,因为转录因子发挥基因调控的功能应该在核内,提总蛋白的话会有胞浆蛋白的干扰。
2楼2009-04-18 19:05:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xialinfzdx

金虫 (初入文坛)

我想知道哪种核蛋白提取方法不影响蛋白质后续与DNA的结合~
3楼2009-04-19 08:57:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anik

银虫 (正式写手)

没研究过。。。
4楼2009-04-19 13:24:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张力民1598

铜虫 (小有名气)

你买试剂盒吧,就是比较贵。
5楼2009-04-20 09:30:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xialinfzdx 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 07化学303求调剂 +5 睿08 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:46 by 418490947
[考研] 335分 | 材料与化工专硕 | GPA 4.07 | 有科研经历 +6 cccchenso 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:25 by 544594351
[考研] 318求调剂 +5 plum李子 2026-03-21 8/400 2026-03-25 09:26 by aa331100
[考研] 材料调剂 +6 匹克i 2026-03-23 6/300 2026-03-24 21:09 by greychen00
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +6 NIFFFfff 2026-03-20 6/300 2026-03-24 21:02 by hello七七
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +7 holy J 2026-03-21 7/350 2026-03-24 17:24 by xiaohai104
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 317求调剂 +12 申子申申 2026-03-19 18/900 2026-03-22 22:23 by luoyongfeng
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 315分,诚求调剂,材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[基金申请] 学校已经提交到NSFC,还能修改吗? 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 288求调剂 +16 于海海海海 2026-03-19 16/800 2026-03-20 22:28 by JourneyLucky
[考研] 求调剂一志愿南京航空航天大学289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-20 21:34 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见