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wlyu1228

新虫 (小有名气)

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专业: 环境微生物学

[交流] 细菌DNA提不出来!

大提DNA用于杂交。这种菌很容易破壁,加SDS后几分钟后就变透明,但是最后无论用异丙醇还是无水乙醇都看不出有DNA沉淀。

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-19 at 13:01 ]

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1楼 2009-04-18 14:00:21

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smallcat227

木虫 (著名写手)

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专业: 环境微生物学

引用回帖:

Originally posted by 木虫－虾米 at 2009-4-29 18:40:
细菌煮沸法提DNA：100摄氏度，10min；10000转离心10min，上清为所要DNA。
方法简单，可一试！

楼主的菌是阴性菌么，阴性菌用煮沸法的话效果很好的，不过照理说阴性菌DNA蛮好提的

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8楼2009-04-29 21:33:12

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guohanyan

金虫 (正式写手)

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专业: 配位化学

可以试试低温乙醇：按照正常的操作步骤，只是将乙醇事先密封好在冰箱里冷却24h；其次就是用0.14mol/L的NaCl溶液洗涤DNA提取物，因为DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度很低，但蛋白质的溶解度很高，这样就能洗去蛋白质。最后，可以用稀二苯胺在加热的条件下检测是否提取出了DNA（现象：变蓝）

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2楼2009-04-18 14:30:08

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