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wlyu1228

新虫 (小有名气)

[交流] 细菌DNA提不出来!

大提DNA用于杂交。这种菌很容易破壁,加SDS后几分钟后就变透明,但是最后无论用异丙醇还是无水乙醇都看不出有DNA沉淀。

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-19 at 13:01 ]
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smallcat227

木虫 (著名写手)

-20度沉淀的时间长一点,然后离心的转速大一点,时间长一点,有时候确实看不到有DNA沉淀的,或者有时会看到明显的蛋白沉淀,没关系,用TE溶解后电泳检测才能知道最后结果

祝楼主好运!
5楼2009-04-29 14:33:42
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查看全部 9 个回答

guohanyan

金虫 (正式写手)

可以试试低温乙醇:按照正常的操作步骤,只是将乙醇事先密封好在冰箱里冷却24h;其次就是用0.14mol/L的NaCl溶液洗涤DNA提取物,因为DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度很低,但蛋白质的溶解度很高,这样就能洗去蛋白质。最后,可以用稀二苯胺在加热的条件下检测是否提取出了DNA(现象:变蓝)
2楼2009-04-18 14:30:08
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随风而过

银虫 (小有名气)

用无水乙醇要低温然后离心
3楼2009-04-29 08:02:51
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xia710516

金虫 (正式写手)

这可能不是在沉淀这步出的问题。
6楼2009-04-29 18:38:00
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