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小木虫论坛-学术科研互动平台» 网络生活区» 有奖问答 » 有奖问答完结子版 » dna提取中没有提出dna 只有rna怎么回事啊？
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liuxiaohui0908

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1楼 2009-04-14 17:06:03
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liuxiaohui0908

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2楼2009-04-14 17:10:16
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gzsjls

木虫 (职业作家)

纯纯家族之纯火星
没长DNA，只长了RNA吧！
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3楼2009-04-14 18:39:33
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zdmei

金虫 (小有名气)
★
liuxiaohui0908(金币+1,VIP+0):xiexie 4-15 07:58
不太相信，RNA比DNA容易降解多了,确定那是RNA吗
CTAB可以用于从大量产生粘多糖的有机体如植物以及某些革兰氏阴性菌（包括E.coli的某些株）中制备纯化DNA 。
个人认为在第一步加入蛋白酶K时可同时加入RNase 以降解RNA

CTAB法原理    CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl)，CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物，只是不能沉淀核酸。通过有机溶剂抽提，去除蛋白，多糖，酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。

CTAB提取缓冲液的经典配方
Tris-HCl (pH8.0)提供一个缓冲环境，防止核酸被破坏；
EDTA螯合Mg2+或Mn2+离子，抑制DNase活性；
NaCl 提供一个高盐环境，使DNA充分溶解，在于液相中；                               CTAB溶解细胞膜，并结合核酸，使核酸便于分离；
β-巯基乙醇是抗氧化剂，有效地防止酚氧化成醌，避免褐变，使酚容易去除
PVP(聚乙烯吡咯烷酮)是酚的络合物，能与多酚形成一种不溶的络合物质，有效去除多酚，减少DNA中酚的污染；同时它也能和多糖结合，有效去除多糖。   
  
用乙醇沉淀DNA时，通常要在溶液中加入单价的阳离子，如NaCl 或 NaAc，Na+中和DNA分子上的负电荷，减少DNA分子之间的同性电荷相斥力，而易于聚集沉淀。
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4楼2009-04-14 19:47:57
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myplum

木虫 (小有名气)
太难了，不清楚，帮忙顶一下了嘿嘿
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5楼2009-04-14 19:53:37
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bsy330

木虫 (正式写手)
我的两者都有  而且量差不多   呵呵  不过我觉得提不出DNA，那RNA就不可能存在了
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6楼2009-04-14 20:46:12
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liuxiaohui0908

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7楼2009-04-14 20:47:25
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liuxiaohui0908

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8楼2009-04-14 22:06:04
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xiaoke2046

木虫 (知名作家)
★ ★ ★ ★ ★
liuxiaohui0908(金币+5,VIP+0):xiexiea 4-15 17:55
dna降解有很多因素其中有几条要注意
（1）在吸打混匀时 移液抢枪头剪掉一块 并且慢慢混匀 防止dna断裂
（2）抽提时颠倒混匀次数要少 一般3次
（3）离心转速要小5000转左右
（4）确定所用溶液没被离子等杂质污染等
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9楼2009-04-15 17:42:31
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