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sherry2902铜虫 (初入文坛)
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[交流]
【请教】透析袋的使用
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在去离子水流动透析中，使用透析袋的时候，需要将其全部浸在去离子水中吗？ 更换去离子水的时候是直接把透析袋取出换吗还是什么方法？ 透析同一种蛋白质，透析袋可以反复使用吗，如何对使用过的透析袋进行处理 灰常感谢！ 新手无知。。，请不要见笑~ [ Last edited by sherry2902 on 2009-4-14 at 12:49 ] |
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楼主求助前可以搜索下，本版已经有好几个透析袋帖子了
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yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎应助 4-16 17:20
yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎应助 4-16 17:20
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用透析袋前，首先你肯定知道原理，以及材料的截留分子量。至于透析什么时候算彻底，这个无法一概而论。你可以参考如下思路： 1. 如果被透析的杂质分子量和你的目的物差距很大，且水中有一定溶解度（几十微克就行），那么你可以选择截留分子量尽可能大的透析袋（但不能目的物分子量），勤换水，一天三次，三天就可以了。 2. 如果杂质和目的物分子量差别不大，理论上不适合透析，如果非得用，截留分子量一定要靠近杂质，如果物质水溶性不好，而缓冲盐有不会破坏目的物，可以用缓冲盐体系透析。这需要五六天。 3. 透析是不可能把杂质透干净的，毕竟是一种温和平衡纯化方法，其最大的优势在于简单和温和。如果你不要求样品绝对纯净，样品又比较娇气，这是首选，如果不是，则另想办法。 4. 还有一个鉴定是否透析完全的办法，就是测透析液中杂质的浓度，（紫外吸收，荧光谱，HPLC都行，如果杂质有色，目测也行，哈哈） 透析袋处理方法： 透析袋一般来讲，最好一次性利用。但是考虑到我们都是小实验室，科研经费紧张，如果对样品的纯度没有很严格的要求，还是可以重复利用的。但是不要重复利用太多次，一般5次就差不多了，而且透析时尽量避免有机溶剂（乙醇除外），因为重复多次利用或经有机溶剂腐蚀，虽然从宏观上看袋子完好，但是有可能微观上已有破损或者孔径已经改变，截留分子量（MWCO）已经不可靠。 具体的处理流程，我经常用的，供参考： 1. 将用过的袋子用清水冲洗3遍 2. 加600ml纯净水，0.18g EDTA，10g NaHCO3，煮沸15min 3. 纯净水洗3遍 4. 加600ml纯净水，煮沸15min 5. 纯净水洗3遍 6. 净化的袋子置75%乙醇中，浸泡待用（乙醇兼有抑菌和保持袋的韧性双重功能） 7.再次使用时，用纯净水洗一到两遍就可以了 以下三个帖子，你可以参考下 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=1236473 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=1239866 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=1201511 |
4楼2009-04-16 16:51:42
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