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rainontime

新虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌转化线性DNA已有2人参与

一般我们都会用热击的方法转质粒进感受态细胞。如果要转化的对象是线性DNA,请问要怎么操作呢?谢谢!
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rainontime

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by 宁心king at 2018-11-28 14:43:41
高温才会造成蛋白不可逆变性  电转时电击时间很短,其实电击是会造成部分菌死亡的 所以合适的电压很重要  你该了解下蛋白变性相关知识

好的,谢谢!因为冻融会使蛋白失活,所以才问了这个问题。感谢指教~~

另外,您提到了pKD46质粒,我也在用这个质粒。PKD46质粒里λ-red,有gam、bet和exo三个蛋白,但只有一个araB promoter,三个蛋白的CDs都有终止密码子和起始密码子。为什么gam后面的bet和exo也会表达呢?不是只表达启动子后面遇到的第一个阅读框吗?
想不明白,求指点。
谢谢~~~
11楼2018-11-28 15:35:29
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宁心king

新虫 (正式写手)

2楼2018-11-05 13:29:39
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rainontime

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 宁心king at 2018-11-05 13:29:39
电转化

实验室没有电转仪。。。请问需要什么耗材吗?
3楼2018-11-05 13:52:16
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宁心king

新虫 (正式写手)

电转仪,,,电击杯

发自小木虫Android客户端
4楼2018-11-05 14:34:09
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