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枯草的质粒无法单酶切和双酶切
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我构建了一个重组质粒,经由大肠杆菌提取,再导入至枯草芽孢杆菌。现在发现从枯草里面提取的重组质粒单酶切和双酶切都切不动(使用之前构建重组质粒的内切酶),但之前从大肠提取出来的重组质粒都切得十分顺利。而且这两个质粒进行相同引物PCR的时候,就发现大肠来源的重组质粒比枯草来源的重组质粒片段短一点,大概几百bp的样子。 求问有没有人知道原因的,现在PCR和酶切都无法判断枯草转化子是不是对的,好纠结。 发自小木虫Android客户端 |
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