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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 载体酶切回收后,电泳弥散的问题

我最近碰上一个问题,那就是我有一个GFP的载体,Xbal酶切后电泳,看到已经切开,条带也较亮,用切胶回收的办法回收载体片段,测浓度几十ng/ul,我想在电泳看一下条带,结果却很弥散,做了两次均如此。回收前还好好的,不应该是星活性,难道是电泳的原因?回收产物盐浓度高一些,还是回收的问题?我是按说明来的啊。求各位高人解答。

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duanjifu520

铜虫 (正式写手)

★ ★
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lwk5716: 金币+1 2018-10-03 12:41:47
弥散多严重?上电泳图,大伙可以帮忙分析

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2楼2018-10-03 05:39:02
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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by duanjifu520 at 2018-10-03 05:39:02
弥散多严重?上电泳图,大伙可以帮忙分析

我现在手头没有图,不过从5Kb以下都有一片,但我的条带比5kb大不少,但在5kb以上确没有带

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3楼2018-10-03 12:40:58
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linhaobua

禁虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
lwk5716: 金币+1 2018-10-03 15:45:16
本帖内容被屏蔽

4楼2018-10-03 14:01:49
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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-10-03 22:13:31
引用回帖:
4楼: Originally posted by linhaobua at 2018-10-03 14:01:49
你用的是哪个公司的试剂盒,回收后的浓度也太低了,我怀疑是凝胶回收出现的问题

用的天根的,回收60ng /ul,这个回收浓度在实验室里不低,以前也是这样,不过载体回收后,以前也没跑胶看过,这次没连上,想看跑胶一下载体,结果发现这个问题。

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5楼2018-10-03 15:45:07
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匿名

用户注销 (正式写手)


lwk5716: 金币+1 2018-10-05 22:48:14
本帖仅楼主可见
6楼2018-10-05 21:22:48
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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 大-木-虫 at 2018-10-05 21:22:48
直接做,先试试

好,我先试试

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7楼2018-10-05 22:48:29
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