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baobeiding金虫 (小有名气)
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【求助3500外源片段怎么插入到载体上？】+【有效期至2009年04月15日】，
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我现在有一段3500的外源片段！想把它插入到6900的载体上! l连接了两次都没有成功！我的3500多的外源片段是由3个小片段构成！每段1000多！6900的载体是外国人造的！找不到质粒图谱！我去年构建完这个质粒后发现质粒变小了少了4000多！找不到原因！我插入的外源片段还在！（每个小片段都能用单酶切切出来，PCR也能P出来！）所以现在想连在一起的这三段切下来连到载体上！~从新连接下！我用的质粒是穿梭质粒pBT2。 请问给位大侠有pRB373的质粒图谱么？该质粒上有一段序列来自该质粒！ 谢谢~！ 请大家帮我想想，我应该从哪里入手！！重新连接~！该怎么优化~！ 我连接的体系是 外源片段：2ul 载体 ：3ul 酶和buffer:5ul(试剂盒) 16°连接过夜！ |
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