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baobeiding金虫 (小有名气)
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【求助3500外源片段怎么插入到载体上?】+【有效期至2009年04月15日】,
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我现在有一段3500的外源片段!想把它插入到6900的载体上! l连接了两次都没有成功!我的3500多的外源片段是由3个小片段构成!每段1000多!6900的载体是外国人造的!找不到质粒图谱!我去年构建完这个质粒后发现质粒变小了少了4000多!找不到原因!我插入的外源片段还在!(每个小片段都能用单酶切切出来,PCR也能P出来!)所以现在想连在一起的这三段切下来连到载体上!~从新连接下!我用的质粒是穿梭质粒pBT2。 请问给位大侠有pRB373的质粒图谱么?该质粒上有一段序列来自该质粒! 谢谢~! 请大家帮我想想,我应该从哪里入手!!重新连接~!该怎么优化~! 我连接的体系是 外源片段:2ul 载体 :3ul 酶和buffer:5ul(试剂盒) 16°连接过夜! |
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