| 查看: 719 | 回复: 0 | ||
静默人声412木虫 (小有名气)
|
[求助]
ITSI 荧光定量
|
|
一、我使用引物:ITS5-1737 :GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG ITS2-2043:GCTGCGTTCTTCATCGATGC 想要使用荧光定量对土壤真菌进行定量研究,可是在克隆制作标准曲线时,PCR结果电泳出现两条带,一条在200bp(亮),一条在300bp左右(浅)。 尝试了更改了实验程序后,还是这样,想问一下有没有做过ITSI区域荧光定量的同仁,能解一下惑。 二、在使用宝生物的PMD19-T(simple)克隆后,提取质粒跑电泳却只有不到2000bp条带(应该有3000多bp才对),测序结果显示有插入片段,但是用插入片段的特异性引物去载体后片段大小都小了几十bp,这个质粒还能用于制作荧光定量的标准曲线吗?可以用克隆后,菌落PCR和测序验证后的PCR产物可以用于制作标准曲线吗? |
» 猜你喜欢
SEL120-34A HCl:CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
氢氧化钾活化操作
已经有19人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有71人回复
散金
已经有68人回复
生物质超级电容器
已经有0人回复
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882:可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
AM630(CAS 164178-33-0):CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
ADC标杆分子T-DM1全解析:从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做?
已经有0人回复
His标签蛋白纯化怎么才能快?
已经有0人回复









回复此楼