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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 天然生物材料 » 【求助】请教DEAE-sephadex G-50的装柱方法
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huanyu9688

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】请教DEAE-sephadex G-50的装柱方法

我想问一下DEAE-sephadex G-50的装柱方法，还有可不可以不通过DEAE-sephadex柱而用其他简单的方法从水中分离蛋白啊？急！谢谢！
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1楼 2009-04-08 22:54:27
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travelerchem

至尊木虫 (知名作家)
★
wgcui(金币+1,VIP+0):谢谢! 4-9 11:24
透析可行否？
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2楼2009-04-09 09:59:26
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huanyu9688

新虫 (初入文坛)

请教

能不能说得具体一些啊？谢了！
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3楼2009-04-09 14:26:33
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lidefu

铁杆木虫 (小有名气)
★
yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎应助 4-17 18:01
我用的水中分离蛋白的方法：蛋白溶液加入一定量的盐溶液，蛋白发生盐析沉淀出来，过滤后将蛋白沉淀物透析除去盐，即可。不同的蛋白需要的盐浓度不太一样，你可以查查文献。
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庄敬日强，安肆日偷
4楼2009-04-17 17:14:29
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客
★
yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎应助 4-19 09:36
方法很多，比如
1、盐析，如楼上所说，但一般又叫做硫酸铵沉淀法
2、分子筛
3、离子交换
4、亲和层析
5、反向层析
6、等电点沉淀
7、。。。。。。太多了，你去看看汪家政的蛋白质技术手册吧。
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For my life！
5楼2009-04-18 22:54:41
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huanyu9688

新虫 (初入文坛)

谢谢你提供的方法，但是。。。

★
wgcui(金币+1,VIP+0):欢迎讨论！！ 4-22 08:34
我们现在在用一种仿生法合成纳米晶，但是想知道除了用DEAE-Sephadex-A-50层析法处理分理出蛋白得到我们需要的纳米晶以外还有没有其他的更可行简单的方法。如果有的话希望不吝赐教，非常感谢！
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6楼2009-04-20 16:08:32
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lujun01

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
薰衣草儿(金币+1,VIP+0):谢谢生物专家，期待您更多的参与 5-25 14:31
薰衣草儿(金币+1,VIP+0):鼓励新虫，再奖！ 5-25 14:40
你的是分子筛,用来进行溶液体系交换还可以,分离蛋白效果不好
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7楼2009-05-25 13:45:32
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老汤2835

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
薰衣草儿(金币+2,VIP+0):鼓励新虫讨论！欢迎常来生物材料版 5-25 16:40
DEAE-sephadex G-50的装柱方法
1.溶胀，计算柱床体积，算出所需担体量，将担体充分溶胀
2.装柱。封闭柱下端，溶胀好的担体混旋装入柱内，接近上端停止。
3.打开柱下端，让溶剂缓慢流出，仔细观察，待担体接近沉降完全前，缓慢将剩余的混旋担体加入，这样做的目的是使柱体不会分层。
4.反复步骤3，直至装满柱体。关闭柱下端，装上柱上盖。
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8楼2009-05-25 16:17:03
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