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mjl3680木虫 (小有名气)
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[交流]
蛋白表达问题
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我是用pet30a+做表达载体，构建的质粒包括了两段要表达的基因，这两段基因前一个就是N端有ATG没有终止密码子，后一个有ATG也有终止密码子，这样构建的质粒转化到大肠杆菌，发现后面一段基因表达了，因为后一段是荧光蛋白，菌诱导后有很强的荧光，不知道是量不够还是什么原因,SDS-PAGE看不出条带，这种情况，是融合表达，还是跳过前面那段基因直接表达后面这段呢？两段外源基因都700bp左右，请知道的兄弟姐妹们指点。 做WB还得费好多事，有没有别的方法检测，电泳都看不到，用NI柱也没分离到，什么原因啊 |
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