| 查看: 1138 | 回复: 4 | ||
[求助]
求助分子克隆 已有1人参与
|
| 本人正在克隆一个基因，大小1500bp，有这个基因的质粒A，但是这个质粒上的这个基因带有标签，现在我需要一个不带标签的质粒，并将它克隆到另外一个质粒B上。我先将这段基因复制出来，然后纯化，再将质粒B和pcr产物进行双酶切，由于pcr产物酶切后变化不大，因此只做了质粒酶切后电泳，基本上是酶切完全的，之后按照体系进行连接，16度连接过夜，但就是始终连接不上，长不出阳性菌，有的甚至不长菌。因为刚刚转化成功了另外一个质粒，所以，平板和感受态可以确定没有问题，但就是连接做不出来，请大神帮忙分析分析，看我到底哪里出错了，哪里应该注意的。 |
回复此楼» 猜你喜欢
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner
已经有0人回复
-
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有299人回复
-
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂
已经有0人回复
-
DMXAA：从血管破坏剂到STING通路研究的关键工具分子 | Biochempartner
已经有0人回复
-
靶向PD-L1的人源化单克隆抗体阿特珠单抗
已经有0人回复
-
"探针之父"(+)-JQ-1如何改变表观遗传研究 | Biochempartner
已经有0人回复
-
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
2楼2018-09-19 10:48:21
我欲乘风归去
木虫 (正式写手)
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 3280.1
- 散金: 1055
- 红花: 26
- 帖子: 841
- 在线: 878.8小时
- 虫号: 3340869
- 注册: 2014-07-27
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
3楼2018-09-19 22:58:23
4楼2018-09-21 10:33:28
zw破风
金虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 3751.2
- 红花: 4
- 帖子: 763
- 在线: 160.9小时
- 虫号: 4462845
- 注册: 2016-03-03
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
5楼2018-09-21 13:09:55