应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » WB没有条带
101/1返回列表
查看: 3390  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

rainontime

新虫 (小有名气)

[求助] WB没有条带

楼主在pcDNA3.1上插入了一段外源序列，瞬转48小时收，HA标签，没有目的条带。
1. 阳参正常，排除操作和抗体
2. 序列正确，测序了，ATG啥的都没问题
3. actin正常
4. 阳参和实验组都是外源蛋白，而且差不多，阳参比如是A，实验组就是A后面又加了一段序列而已，形成B。二者的载体骨架都一样的。都是HA标签。

请大家帮忙分析一下，是咋回事哈？？是B的转染效率低吗？还是别的原因？？谢谢！！
回复此楼

» 本帖@通知

@rainontime

» 猜你喜欢
1楼 2018-09-17 12:03:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

美亿美生物

捐助贵宾 (职业作家)

技术服务-实验代做
这个嘛

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
2楼2018-09-17 12:04:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhu0612331

铜虫 (正式写手)
A后面有没有带终止密码子，带了那就是B没表达了。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2018-09-17 13:18:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rainontime

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-09-17 13:18:32
A后面有没有带终止密码子，带了那就是B没表达了。

a后面的密码子去掉了呀，序列反复确认了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
4楼2018-09-17 14:09:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rainontime

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-09-17 13:18:32
A后面有没有带终止密码子，带了那就是B没表达了。

而且如果是因为这个原因的话，至少也会检测出a吧，不会啥也没有的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
5楼2018-09-17 14:16:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rohdy

新虫 (著名写手)
分子量大吗？如果太大可能存在转染效率低的问题

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2018-09-17 14:19:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rainontime

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by rohdy at 2018-09-17 14:19:40
分子量大吗？如果太大可能存在转染效率低的问题

95kda

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼
7楼2018-09-17 14:26:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhu0612331

铜虫 (正式写手)
95KD不算大，确认加入B没有造成移码突变

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2018-09-17 15:24:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rainontime

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-09-17 15:24:02
95KD不算大，确认加入B没有造成移码突变

确定没有，我拿质粒的测序结果直接用软件进行氨基酸翻译，一切都很正常的。我真是要吐血了。
赞一下 回复此楼
9楼2018-09-25 08:54:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxhhyb

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by rainontime at 2018-09-25 08:54:14
确定没有，我拿质粒的测序结果直接用软件进行氨基酸翻译，一切都很正常的。我真是要吐血了。...

您好
我想问下您这个问题最后解决了吗
赞一下 回复此楼
10楼2018-11-13 08:35:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 rainontime 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 08工学调剂 +12 用户573181 2026-03-20 17/850 2026-03-24 21:45 by 番茄炖了西红柿
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +5 谷雨上岸 2026-03-23 6/300 2026-03-24 16:32 by laoshidan
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料，材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 7/350 2026-03-24 11:23 by 种大树
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +9 材料学257求调剂 2026-03-23 10/500 2026-03-24 07:36 by wangy0907
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +5 葵梓卫队 2026-03-18 7/350 2026-03-23 16:26 by lingjue
[考研] 317求调剂 +12 申子申申 2026-03-19 18/900 2026-03-22 22:23 by luoyongfeng
[考研] 寻找调剂 +4 倔强芒? 2026-03-21 4/200 2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 化学调剂 +5 yzysaa 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:12 by peike
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[基金申请] 学校已经提交到NSFC，还能修改吗？ 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭