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提取真菌中的DNA
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最近在提霉菌的DNA，然后我的步骤是用无菌水洗培养皿上培养好的霉菌，离心去上清（4℃，12000r/min,15min），将沉淀用1mL的DNA提取液溶解，65℃水浴1h30min(每隔10min进行摇晃），然后加入60uL 20mg/mL溶菌酶，37℃稍微水浴，再加入10uL蛋白酶k和10uLRNA酶，37℃水浴30min（每隔10min进行摇晃），离心取上清（4℃，12000r/min，5min），加入1/2上清液体积的Tris平衡酚，以及和上清液等体积的酚：氯仿：异戊醇（25:24:1）混匀，离心（4℃，12000r/min，5min），取上清，加入等体积的氯仿：异戊醇（24：1），混匀，离心，取上清加2.5倍体积的无水乙醇，混匀，-20℃放置过夜，离心取上清，加入400uL75%乙醇，吹干，用水溶解。 现在问题出在加了无水乙醇之后，我放在-20℃过夜之后还是没有沉淀，也没有絮状物，请问我是哪一步可能出了问题呢？ |
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